工作总结|分子生物学技术支持工作总结(范文十七篇)
时间：2024-09-18分子生物学技术支持工作总结(范文十七篇)。
[1] 分子生物学技术支持工作总结
摘要：工学结合是高职教育人才培养的创新模式。本文基于该模式指导，探讨了促进高职数学教学改革的有效策略，以期能促进高职数学教学目标的顺利实现。
高职教育体系是以就业为导向，以培养学生的综合素质和实践能力为主要教学目的。工学结合模式为理论知识学习和职业专业技能相结合的创新人才培养模式。基于此理念，高等数学教学需进行相应的优化和改革，以更加适应市场和企业的发展需求。
在高职教育体系中，数学教育是极其重要的组成部分。就其教育功能而言，数学教学具备基础数学素养的育智培养，同时也囊括应用数学逻辑思维的实用培养。数学作为理工科及相关学科的基础教学课程，具有文化素质培养和数学技术教育的双重服务功能，在开发学生的智力资源和逻辑思维方面具备积极的作用，同时对于学生的技能培养也能起到极为关键的基础性作用。在当前课程改革的形势下，构建工学结合模式，实现高职数学教学的优化和改革，有助于加强数学学科的实用服务功能，增强人才培养的专业性，以工学结合的对口培养提升学生理论联系实际的能力，从而促进学生向应用型人才培养方向发展，实现学校与社会及企业的无缝对接。
在高职教育体系中，数学教学传统模式以教师课堂授课为主要方式，学生处于被动的知识接受地位，同时对于数学课程学习停留在理论知识的学习阶段。这一模式有其积极意义，有助于数学知识的系统化讲解，但也存在一定弊端，不利于学生主观能动性的充分发挥。基于工学结合模式下的高职数学教学改革，应强化学生的主体性作用，增强其实践意识。这可以通过学生所学专业的对应职业能力分解，帮助学生了解所需具备的职业素质，以此与数学理论知识进行有效结合，帮助学生增强数学知识的实践意识和运用能力，从而促进综合素质的提升。以机械类专业为例，这一专业对于数学知识的应用程度需求较高。高职数学教学中的空间想象能力、向量解析能力、空间几何知识以及运筹学理论等知识都是该专业需要必备的基本数学知识，通过机械类职业所需能力要求的分析，引导学生将数学理论知识应用到零部件设计和制作的工作实践之中，从而促进学生综合能力的全面提升，避免数学理论教学的空洞化，增强其实践服务的教学功能目的。
高职院校工学结合教学模式是兼顾理论学习和工作实践的创新人才培养方式。在工学结合教学模式的指导下，高职数学课程需在教学理念、教学内容、教学方法、教学流程及教学成果反馈等方面进行优化和创新，以适应不断变化的社会、市场及企业的发展需求。在校期间，学生需接受基础文化课程及专业知识的理论教育；而在实训基地学生则需接受职业能力培养教育及相关的职业技能培训，以完成生产性作业为教学考核成果。基于工学结合模式下，高职数学教学改革应积极构建校企协作平台，以市场和企业的发展需求指导数学教学体系的优化。同样以理工科专业为例，在高职院校学习期间，针对数学课程的学习可实现模块化学习，在基础数学知识的必修课基础上增加与理工科专业直接相关的专业知识学习，通过实训基地和企业平台的实践活动加强数学知识学习的应用，同时也能通过实践活动指导数学理论知识教学方向的调整。将学习和实践两者之间进行有效结合，从根本上促进学生提升应用能力，为企业提供对口的人才队伍配备。
高职数学传统教学模式以课堂教学为主要形式，因此数学课程考核方式也以笔试为主，针对学生的数学知识掌握情况进行直接测试，通过分数判断学生的知识能力。基于工学结合的新型人才培养模式下，数学课程考核方式的优化也成为了数学教学改革的重要部分。这需要由传统的笔试考核转变为笔试、实践成果考核等多种方式结合，一方面考查学生的数学理论知识的掌握情况，另外一方面则加强学生对于实践能力的重视，加强数学的实验学习积极性，注重数学思维能力和实践素质的全面提升。应用创新考核模式需要学校与企业进行有效协作，针对学生素质和能力进行综合考查。
工学结合模式下，高职数学教学需进行相应的优化和改革，以培养学生综合能力为主要教学目标。首先需要强化学生的主体地位，避免传统教学模式的弊端，增强学生的实践意识；其次需构建校企协作的有效共建模式，为学生提供工学结合的学习的平台；最后需优化考核模式，改善单一考核模式的不足，从而促进高职数学教学的优化和改革。
参考文献：
曾亮.基于工学结合的高职机电类专业高等数学教学改革研究.兰州文理学院学报:自然科学版,,01:90-94.
王荣琴.以工学结合为指导，构建高职数学教学新模式.成都电子机械高等专科学校学报,,01:61-64.
[2] 分子生物学技术支持工作总结
摘要：高等院校大部分专业都要学习高等数学课程，高等数学的教学质量对学生后续课程的学习和解决问题能力的培养有着重要意义，但是在高等数学的教学过程中还存在着一些问题。本文主要结合实际问题，对高等数学教学的创新做一些研究，提一些建议。
高等数学在高等教育中的地位不够明确，有些院校的一些专业盲目地压缩课时，结果就只能删减课程内容而导致不能达到预期的教学效果。另外，有部分学生不能理解学习高等数学的意义，甚至有少数人认为学数学没用，这就影响了学生学习的积极性，进而影响了人才培养的质量。高等院校各专业的教学和研究都在不断更新以适应社会经济的发展，而高等数学课程的教材内容相对陈旧，并且比较注重数学思维的严密性、逻辑性以及解题方法和技巧，忽视了学生创新能力和应用能力的培养。在传统教育思维模式影响下，大部分教师在高等数学的教学过程中过于注重知识的传授，将学生的学习过程当做简单的信息积累和加工而不能主动引导学生参与到发现问题、分析问题和解决问题的探索学习过程中，这不利于培养学生的数学思维以及解决实际问题的能力。所以对高等数学进行教学改革是很有必要的。
随着科技的进步和社会的发展，数学应用的领域日益扩大，在自然科学、金融、经济、工业等各个方面发挥着不同程度的作用。马克思曾说过，“一门科学，只有当它成功地运用数学时，才能达到真正完善的地步”。因此，要充分重视高等数学作为基础课的重要地位以及它在培养学生辩证思维能力、分析和解决实际问题能力方面的重要作用。
在高等数学教学过程中，必须要注意培养学生学习的兴趣。因为只有当学生对数学感兴趣时他们才能静下心来进行学习活动，这是学好数学的前提。关于这方面笔者有以下几点建议：首先要营造良好的课堂氛围、建立融洽的师生关系，这是调动学生学习主观能动性的基础。其次，教师要精心设计多种教学情境来激发学生的求知欲，培养学生的学习兴趣。比如，在讲授知识的过程中穿插一些数学历史小故事，引起学生对数学的兴趣；通过引入数学知识和日常生活相结合的具体实例，让学生体会到高等数学在实践中的应用价值；通过介绍高等数学在其它专业中的相关应用举例，让学生了解数学在各个领域发挥的重要作用。这些不仅能拓宽学生的视野，还可以有效地激发学生学习数学的积极性。
一方面由于高校各专业对数学的需求不太一样，在高等数学的教学过程中可以按照内容和学时的区分来设立不同层次。另一方面，即使是同一专业、同一班级，不同的学生在入校时的数学水平参差不齐。在新生入学后，可以进行分级考试，然后根据不同层次分别开设高等数学教学班，针对不同水平的学生因材施教，最大可能地发挥各层次学生的数学潜力，保证教学质量。对于成绩比较优秀的学生要特别注意培养，创造比较好的条件让他们迅速成长，特别是学有余力的学生，学校可以选派教师在课外开设选修课和兴趣课等，对他们进行一些额外的数学指导，还可以鼓励他们参加数学竞赛等活动，进一步提高他们的数学思维和解决问题的能力。对于成绩欠佳的学生，主要是按照教学大纲的要求进行教学，重点是加强基础知识的训练以及学习能力、思维方法的培养。
改变传统教学模式，确立以学生为主体也就是以学生为中心的教学改革，在课堂上为学生创造比较多的参与到教学活动中的机会。在高等数学的教学过程中，教师传授知识是必要的，但是同时也要注重培养学生养成正确的学习方法和良好的学习习惯，引导学生学会独立思考，这就要求教师在课堂上不能“满堂灌”，而要适当应用启发式和讨论式等多种教学方法相结合，鼓励学生对所研究的问题提出自己的观点和看法，让学生在思考中不仅掌握了数学知识，还获得了掌握知识的方法。此外，高等数学的逻辑性比较强，各章节之间的联系很紧密。教师在教学过程中要注意对前后章节知识点之间进行分析、总结、归纳和类比，把知识结构化、系统化。比如对比一元函数微分学中的结论“函数可导与可微是等价的；可导一定连续但是连续不一定可导”可知多元函数微分学中函数的连续性、偏导数的存在性以及可微性之间的关系就复杂得多。在教学活动中还要注意引入先进的教育技术手段，比如充分利用多媒体和Matlab编程，将比较复杂的空间几何图形形象的呈现在学生面前，让学生对所学的知识有更深入地了解，提高教学效率。
建立科学合理的考核评价机制可以比较全面、准确地反映教学改革的成效。传统的考核方式就是以期末考试成绩为主的考核，导致学生平时不用功，只期望利用考前的临时突击复习取得比较好的成绩，结果导致学生的数学思维和能力不能达到预期的提升高度。要解决这些问题，就要引入多种考核方式，除了试卷成绩、课堂提问和课后作业以外，还可以布置一些课外作业，比如小论文写作、课题设计方案等来提高学生的实践能力和运用知识解决问题的能力，全面提高学生的综合素质。总之，我们要以培养具有高素质和创新能力的人才为目标，以教学内容和方法改革为手段，进一步提高人才培养的质量。
参考文献：
管绍贤．关于高等数学教学改革与探索．读与写杂志，2008（5）：67,81．
[3] 分子生物学技术支持工作总结
【摘要】本文从江西水利职业学院大专学生的学习特征和规律出发，以问题研究为手段，以全面掌握理论知识和熟练运用所学知识去解决实际问题为目标。通过《学生高等数学教学过程感知调查问卷》研究高职学生数学学习课堂，根据数据分析问题，然后提出改革高职课堂数学教学的策略。
从江西水利职业学院多年来的入学成绩看，高职高专学生的数学成绩普遍偏低，数学基础差。通过发放调查问卷，发现绝大多数的学生认为学习数学没用，学了也不会用，对数学学习严重缺乏兴趣，甚至厌烦，根本谈不上学习的积极性，学习数学纯粹是为了应对考试。调查显示只有15%的高职生一周除作业外花2个小时以上学习数学。由此可见，高职学生学习数学主要是靠学校教学，而课堂教学是大专学校数学教学的主渠道。通过改革课堂教学方法，就成为提高课堂教学质量和改善学生数学学习的关键，也是教师进行教学改革的主阵地。
为了全面了解学生数学学习方式、态度、及对教师的意见，使研究具有实际意义，因此在研究的同时也设计了调查问卷。本次调查的调查对象为:江西水利职业学院9月份入学的高职学生。本次调查共发放问卷294份，实际有效问卷268份，有效率为91%。为了使调查结果更具有代表性，结论更具有一般性，我们这次调查采用分层随机抽样的方法，既考虑了系别和专业的分布，又考虑了统招生与预科生的均衡，从抽样调查中可以得出以下结论:(1)在概念教学中，对定义的教学，64%的高职学生认为教师应引导学生从实际问题中归纳，而仅有5%的高职学生认为直接给出，要求学生记住。(2)在公式、法则、定理教学中，44%的高职学生的意向是设计问题，由自己探索得出，而由教师讲解，学生会运用就行的占28%。(3)对例题教学，41%的高职学生喜欢教师与学生互动分析思路，另一方面，33%的高职学生赞成先让学生思考，在引导学生探索解答。(4)在习题课教学中，赞同由学生归纳小结本章内容，找出本章的重点和难点以及多讲例题，多练习，多划重点题目这两种方式，各占34%。(5)关于在课堂教学中，59%的大专生更喜欢师生平等，互相尊敬，学生要大胆发表自己的见解，而仅有6%的大专生赞同教师要严格要求学生，学生只要认真听课就行。(6)在被问到在高职高专学习中，你认为什么是最好的学习方式时，占41%的大学生认为分析问题、解决问题的自学能力是最好的学习方式。单纯为考试而学习教师讲解的重点知识的并不多只占11%。(7)占37%的学生认为现在大专的数学课堂与高中的数学课堂最大区别是高中数学课程比较紧张，现在课堂比较轻松，上课压力小，也有17%的学生认为教师可以就知识的应用程度开展讲，学生可以凭兴趣学，不必考虑考试。(8)学生认为不同的课型采用不同的教学策略，对学习有帮助与很有益占63%。通过问卷调查并进行数据分析得出:大多数大专生希望能在课堂上实现教师为主导，学生为主体，训练为主线的教学模式;大专生不仅希望了解知识的发生、发展，而且注重实用性。培养自己发现问题、分析问题、解决问题的能力。大专生还希望能在数学课堂上培养自己善于观察，勇于探究的良好习惯和严谨的科学态度;希望与教师建立良好的师生关系:民主平等、尊师爱生、教学相长。而且大专生现在的自由学习时间多，意愿找到好的学习方式，为自己的终身学习打下基础。
在教学过程中，要以数学思想方法为灵魂贯穿整个教学过程。我国宋代数学家杨辉说过:“题以法设，法以题验”数学思想和数学知识相互融合，相符相成，不可相互独立。数学思想是数学知识的精髓，例如分析与归纳、特殊与一般、直观与演绎、最优化等。要让学生用“数学头脑”的思维去观察问题和提出问题。高职高专数学课程作用是以育人功能为主线，服务于素质教育，以进行创新能力为重点，服务于能力培养。
现在的高职高专数学存在一个很大弊端:大多数学生不知道如何运用学过的数学知识去解决实际问题，因此有人认为学数学无用。刘来福教授形象地指出:“传统的数学理论是‘烧(鱼的)中段’，也就是说数学理论主要着眼于数学内部的理论结构和他们之间的逻辑关系，并没有讨论如何从实际问题中构造出数学问题(鱼头)，以及如何将数学分析的结果用来解决实际问题(鱼尾)方面的内容。”高职高专数学教学改革就是要变给学生“烧(鱼的)中段”为给学生“烧全鱼”，即不仅要使学生掌握数学理论知识，还要使学生具备应用数学知识去解决实际问题的能力。这要求教师要善于发现数学知识与现实生活的联系，并深入的分析，提高学生的数学应用能力。比如说:日常生活中经常碰到这样一个事实，把椅子放在不平的地面上，通常只有三只脚着地，放不稳。然而只需要稍微挪动几次，就可以使四只脚同时着地，放稳了。这个生活常识可以用闭区间上连续函数的零点定理来解释。通过生活常识不仅能吸引学生的注意，而且能加深学生对闭区间上连续函数的零点定理的理解和现实生活的应用。
调查数据说明大专生更喜欢师生平等，互相尊敬，学生要大胆发表自己的见解。在公式、法则、定理、概念的教学中，高职学生的意向是设计问题，由自己探索得出。由此可见，在高职数学教学过程中教师教、学生学的简单相加的模式已经不适合当代高职生，课堂是教学主体之间进行的交流、对话和沟通。教师不再仅仅去教而且通过与学生讨论的过程中被教，学生在被教的同时也在教，教学相长，形成一个学习共同体。这种对学生角色的定位能促进学生善于发现，勇于探究，用数学的头脑去思考现实生活。
参考文献:
［3］罗增儒，李文铭．数学教学论［M］．西安:陕西师范大学出版社，2001．
[4] 分子生物学技术支持工作总结
实验 质粒DNA的碱裂解法提取与纯化
一、实验原理
细菌质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份，通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态，但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。
质粒已成为目前最常用的基因克隆的载体分子，重要的条件是可获得大量纯化的质粒DNA分子。目前已有许多方法可用于质粒DNA的提取，本实验采用碱裂解法提取质粒DNA。碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法，其基本原理为：当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。
纯化质粒DNA的方法通常是利用了质粒DNA相对较小及共价闭环两个性质。例如，氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心、离子交换层析、凝胶过滤层析、聚乙二醇分级沉淀等方法，但这些方法相对昂贵或费时。对于小量制备的质粒DNA，经过苯酚、氯仿抽提，RNA酶消化和乙醇沉淀等简单步骤去除残余蛋白质和RNA，所得纯化的质粒DNA已可满足细菌转化、DNA片段的分离和酶切、常规亚克隆及探针标记等要求，故在分子生物学实验室中常用。
二、实验试剂
1、溶液Ⅰ： 50mM葡萄糖，25mM Tris-HCl(pH 8.0)，10mM EDTA(pH 8.0）。1M Tris-HCl(pH 8.0）12.5ml，0.5M EDTA（pH 8.0）10ml，葡萄糖4.730g，加ddH2O至500ml。在10 lbf/in2高压灭菌15min，贮存于4℃。
2、溶液Ⅱ：0.2N NaOH，1% SDS。2N NaOH 1ml，10%SDS 1ml，加ddH2O至10ml。使用前临时配置。
3、溶液Ⅲ：醋酸钾（KAc）缓冲液，pH 4.8。5M KAc 300ml，冰醋酸 57.5ml，加ddH2O至500ml。4℃保存备用。
4、TE：10mM Tris-HCl(pH 8.0)，1mM EDTA(pH 8.0)。1M Tris-HCl（pH 8.0）1ml，0.5M EDTA（pH 8.0）0.2ml，加ddH2O至100ml。15 lbf/in2高压湿热灭菌20min，4℃保存备用。
5、苯酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）
6、乙醇（无水乙醇、70%乙醇）7、5×TBE：Tris 碱54g，硼酸27.5g，EDTA-Na2·2H2O 4.65g，加ddH2O 至1000ml。15 lbf/in2高压湿热灭菌20min，4℃保存备用。
8、溴化乙锭（EB）：10mg/ml
9、RNase A（RNA酶A）：不含DNA酶(DNase-free)RNase A的10mg/ml，TE配制，沸水加热15min，分装后贮存于-20℃。
10、6×loading buffer（上样缓冲液）：0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青FF，40%（W/V）蔗糖水溶液。11、1% 琼脂糖凝胶：称取1g琼脂糖于三角烧瓶中，加100ml 0.5×TBE，微波炉加热至完全溶化，冷却至60℃左右，加EB母液（10mg/ml）至终浓度0.5μg/ml（注意：EB为强诱变剂，操作时带手套），轻轻摇匀。缓缓倒入架有梳子的电泳胶板中，勿使有气泡，静置冷却30min以上，轻轻拔出梳子，放入电泳槽中（电泳缓冲液0.5×TBE），即可上样。
三、实验操作
1、挑取LB固体培养基上生长的单菌落，接种于2.0ml LB（含相应抗生素）液体培养基中，37℃、250g振荡培养过夜（约12-14hr）。
2、取1.0ml培养物入微量离心管中，室温离心8000g×1min，弃上清，将离心管倒置，使液体尽可能流尽。
3、将细菌沉淀重悬于100μl预冷的溶液Ⅰ中，剧烈振荡，使菌体分散混匀。
4、加200μl新鲜配制的溶液Ⅱ，颠倒数次混匀（不要剧烈振荡），并将离心管放置于冰上2-3min，使细胞膜裂解（溶液Ⅱ为裂解液，故离心管中菌液逐渐变清）。
5、加入150μl预冷的溶液Ⅲ，将管温和颠倒数次混匀，见白色絮状沉淀，可在冰上放置3-5min。溶液Ⅲ为中和溶液，此时质粒DNA复性，染色体和蛋白质不可逆变性，形成不可溶复合物，同时K+使SDS-蛋白复合物沉淀,4℃离心8000g × 10min, 小心移出上清于一新微量离心管中。
6、加入450μl的苯酚/氯仿/异戊醇，振荡混匀，4℃离心8000g × 10min。
7、小心移出上清于一新微量离心管中，加入2.0倍体积（1ml）预冷的无水乙醇，混匀，室温放置５min，4℃离心12000g×10min，弃上清。
8、加入1ml预冷的70%乙醇洗涤沉淀1次，4℃离心8000g×7min，弃上清，将沉淀在室温下晾干或吹干（不能过于干燥，造成溶解困难）。
9、沉淀溶于20μl TE（含RNase A 20μg/ml），-20℃保存备用。
四、质粒DNA的电泳检测
观察琼脂凝胶中DNA的最简单方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色。该物质含有一个可以嵌入DNA的堆积碱基之间的一个平面基团，这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致染料与DNA结合并呈现荧光，其荧光产率比游离染料溶液有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身则在302nm和366nm有光吸收。这两种情况下，被吸收的能量可在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。因此，当凝胶中含有游离溴化乙锭时即可以检测到少量的DNA。
取制备的质粒DNA 1-2μl，加适当loading buffer混匀上样,采用 1-5V/cm的电压，使DNA分子从负极向正极移动至合适位置，取出凝胶置紫外灯下检测，摄片。
五、注意事项
本裂解法小量制备质粒 DNA重复性好，一般无麻烦。若所提取质粒 DNA不能被限制性内切酶切割，可通过酚/氯仿再次抽提，以清除杂质来解决问题。
六、习题：
1、什么是质粒？质粒有什么主要用途？
2、分子生物学实验中用的质粒是由野生型改建而来的，它必须具备哪三个基本要素？
3、制备的质粒DNA在琼脂糖凝胶上通常以三种形式条带存在，它们分别是什么？
实验 琼脂糖凝胶电泳实验
一、实验目的
（1）学习琼脂糖凝胶电泳的基本原理；
（2）掌握使用水平式电泳仪的方法；
二、实验原理
琼脂糖凝胶电泳是基因工程实验室中分离鉴定核酸的常规方法。核酸是两性电解质，其等电点为pH2-2.5，在常规的电泳缓冲液中（pH约8.5），核酸分子带负电荷，在电场中向正极移动。核酸分子在琼脂糖凝胶中泳动时，具有电荷效应和分子筛效应，但主要为分子筛效应。因此，核酸分子的迁移率由下列几种因素决定：
（1）DNA的分子大小。线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比，分子越大则所受阻力越大，也越难于在凝胶孔隙中移动，因而迁移得越慢。
（2）DNA分子的构象。当DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋质粒DNA在琼脂糖凝胶中移动的速度是不一样的，超螺旋DNA移动得最快，而开环状DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时，可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收，用同一种限制性内切酶分别水解，然后电泳，如在凝胶上出现相同的DNA图谱，则为同一种DNA。
（3）电源电压。在低电压时，线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加，不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长，片段越大，因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大，因此电压增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb 的DNA 片段的分辨率达到最大，所加电压不得超过5v/cm。
（4）离子强度影响。电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。在没有离子存在时（如误用蒸馏水配制凝胶），电导率最小，DNA几乎不移动；在高离子强度的缓冲液中（如误加10×电泳缓冲液），则电导很高并明显产热，严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。
溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)（1）能插入DNA分子中形成复合物，在波长为254nm紫外光照射下EB能发射荧光，而且荧光的强度正比于核酸的含量，如将已知浓度的标准样品作电泳对照，就可估算出待测样品的浓度。由于溴化乙啶有致癌的嫌疑，所以现在也开发出了安全的染料，如Sybergreen。
常规的水平式琼脂糖凝胶电泳适合于DNA和RNA的分离鉴定；但经甲醛进行变性处理的琼脂糖电泳更适用于RNA的分离鉴定和Northern 杂交，因为变性后的RNA是单链，其泳动速度与相同大小的DNA分子量一样，因而可以进行RNA分子大小的测定，而且染色后条带更为锐利，也更牢固结合于硝酸纤维素膜上，与放射性或非放射性标记的探针发生高效杂交。
三、试剂与器材
（一）材料
电泳仪、水平电泳槽、样品梳子、琼脂糖等
（二）试剂 1、50*TAE(1000mL)：242g Tris, 57.1mL 冰醋酸，18.6g EDTA。
2、EB溶液：100mL水中加入1g溴化乙啶，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，分装，室温避光保存。
3、DNA加样缓冲液：0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青，50%甘油（w/v）。
4、DNA分子量标准
四、操作方法
常规的水平式琼脂糖电泳：
制备琼脂糖凝胶：按照被分离DNA分子的大小，决定凝胶中琼脂糖的百分含量；一般情况下，可参考下表：
琼脂糖的含量（%）分离线状DNA分子的有效范围（Kb）
0.3 60-5
0.6 20-1
0.7 10-0.8
0.9 7-0.5
1.2 6-0.4
1.5 4-0.2
2.0 3-0.1
1、制备琼脂糖凝胶：称取琼脂糖，加入1x电泳缓冲液，待水合数分钟后，置微波炉中将琼脂糖融化均匀。在加热过程中要不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液；加热时应盖上封口膜,以减少水份蒸发。
2、胶板的制备：将胶槽置于制胶板上,插上样品梳子,注意观察梳子齿下缘应与胶槽底面保持1mm左右的间隙，待胶溶液冷却至50℃左右时，加入最终浓度为0.5微克/毫升的EB(也可不把EB加入凝胶中,而是电泳后再用0.5μg/ml的EB溶液浸泡染色15分钟)，摇匀，轻轻倒入电泳制胶板上，除掉气泡；待凝胶冷却凝固后，垂直轻拔梳子；将凝胶放入电泳槽内，加入1x电泳缓冲液，使电泳缓冲液液面刚高出琼脂糖凝胶面；
3、加样：点样板或薄膜上混合DNA样品和上样缓冲液，上样缓冲液的最终稀释倍数应不小于1X。用10 μL微量移液器分别将样品加入胶板的样品小槽内，每加完一个样品，应更换一个加样头，以防污染，加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面。（注意：加样前要先记下加样的顺序和点样量）。
4、电泳：加样后的凝胶板立即通电进行电泳，DNA的迁移速度与电压成正比，最高电压不超过5V/cm。当琼脂糖浓度低于0.5%，电泳温度不能太高。样品由负极（黑色）向正极（红色）方向移动。电压升高，琼脂糖凝胶的有效分离范围降低。当溴酚蓝移动到距离胶板中央时，停止电泳。
5、观察和拍照：电泳完毕，取出凝胶。在波长为254nm的紫外灯下观察染色后（2）的或已加有EB的电泳胶板。DNA存在处显示出肉眼可辨的桔红色荧光条带。于凝胶成像系统中拍照并保存之。
五、注意事项
1、EB是强诱变剂并有中等毒性，易挥发，配制和使用时都应戴手套，并且不要把EB洒到桌面或地面上。凡是沾污了EB的容器或物品必须经专门处理后才能清洗或丢弃。简单处理方法为：加入大量的水进行稀释（达到0.5mg/mL以下），然后加入0.2倍体积新鲜配制的5%次磷酸（由50%次磷酸配制而成）和0.12倍体积新鲜配制的0.5mol/L 的亚硝酸钠，混匀，放置1天后，加入过量的1mol/L碳酸氢钠。如此处理后的EB的诱变活性可降至原来的1/200左右。
2、由于EB会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA，使DNA迁移率降低。因此，如果要准确地测定DNA的分子量，应该采用跑完电泳后再用0.5μg/ml的EB溶液浸泡染色的方法。
六、实验报告要求与思考题
1、附上电泳结果的图片并进行正确的标注（如下图）
M：1Kb DNA ladder；1：质粒DNA
2、琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响？
3、如果样品电泳后很久都没有跑出点样孔，你认为有哪几方面的原因？
4、为什么分子生物学实施时要担心EB？
5、琼脂糖凝胶电泳时胶中DNA是靠什么发出荧光的？为什么？
电泳流程图：
实验 PCR扩增eGFP基因
一、PCR技术的基本原理
PCR类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。(Plateau)。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
PCR 技术应用广泛，不可能有这样一套条件满足所有的实验，但本实验所介绍的方法可适应于大多数DNA 扩增反应，即使有的不适应，至少也确定了一个共同的起点，在此基础上可以作多种变化。不过下列因素在实验应用时应予以特别注意，以求取得满意结果。
1、模板：单、双链DNA 和RNA都可以作为PCR样品，若起始材料是RNA，须先通过逆转录得取第一条cDNA。虽然PCR 可以仅用极微量的样品，但为了保证反应的特异性，一般宜用ng 量级的克隆DNA，ug 级的染色体DNA，待扩增样品质量要求较低，但不能混合有任何蛋白酶、核酸酶，Taq DNA聚合酶的抑制剂以及能结合DNA 的蛋白质。
2、引物：引物是决定PCR 结果的关键，下列原则有助于引物的合理设计。（1）尽可能选择碱基随机分布，GC 含量类似于被扩增片段的引物，尽量避免具有多聚嘌呤、多聚嘧啶或其它异常序列的引物。（2）避免具有明显二级结构（尤其是在引物3'—末端）的序列。
3、防止引物间的互补，特别要注意避免具有3'末端重叠的序列。
4、引物的长度约为20个碱基，较长引物较好，但成本增加，短引物则特异性降低。
5、引物浓度不宜偏高，过高易形成二聚体解链；然后冷却至37—55℃，使引物与模板退
二、实验试剂
（一）仪器与器皿
PRC 扩增仪，琼脂糖凝胶电泳设备，微量取样器，一次性eppendorf管，凝胶成像仪
（二）试剂与材料
1、琼脂糖凝胶电泳试剂
1）电泳缓冲液：Tris—乙酸0.04mol/L PH8.0 0.002mol/L EDTA
2）加样缓冲液：0.25%溴酚兰40% w/v蔗糖
3）溴化乙锭溶液：0.05mg/ml溴化乙锭/水
4）琼脂糖
2、TaqDNA 多聚酶3、5´反应缓冲液：
125mmol/L Tris-HCl pH8.2；10mmol/L MgCl2；0.5mg/ml gelatin；125mmol/L(NH4)2SO4； Formamide 25%
4、混合dNTP 液(dATP dGTP dTTP dCTP各2.5 mmol/L)
5、DNA 模板
6、引物 1（10μmol/L）
7、引物 2（10μmol/L）
8、无菌水
三、实验步骤
1、按顺序在200μl 指形管中加入以下试剂与样品：（因购入的试剂批次不同，加样时有所差别，以预实验结果为准。
1）ddH2O 37μl
2）10*Buffer 5μl(含有MgCL2)
3）dNTP ２μl
4）引物1(上游)２μl
5）引物2（下游）２μl
6）模板 1μl（pEGFP质粒）
7）TaqDNA聚合酶１μl（2.5U）总体积共50μl
2、在PCR 扩增仪上按以下反应条件编入程序：（以下为参考值，因扩增的DNA片段不同，各类PCR 扩增仪程序设定各不相同，编程过程视扩增的DNA 片段的要求及仪器而定参数。）
1)预变性 94℃ 3 分种
2)循环条件（30 次）
变性 94℃ 30 秒
复性 55℃ 30 秒
延伸 72℃ 1分
3)延长延伸 72℃ 7 分钟
编完反应程序，置反应管于PCR扩增仪的反应孔中，开动机器，扩增循环反应开始。
3、PCR 扩增完毕，配1.5%琼脂糖凝胶，电泳观察结果。
4、凝胶成像仪或紫外灯下观察实验结果，是否已扩增到实验设计的DNA片段
四、习题
1、PCR反应液中主要成分是哪些？在PCR反应过程中各起什么作用？
2、为什么在PCR反应过程中，使用三个不同的温度变化？
3、用PCR扩增目的基因，要想得到特异性产物需注意哪些事项？
实验 从动物组织（猪肝）中提取DNA
一、实验内容
采用SDS裂解和蛋白酶K消化法从猪肝中提取DNA，并进行琼脂糖凝胶电泳分析。目的
(1)掌握SDS裂解法从猪肝中的原理和方法；(2)巩固DNA的琼脂糖凝胶电泳分析实验。
二、实验原理
DNA是一切生物细胞的重要组成成分，主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞；苯酚和氯仿可使蛋白质变性，用其混合液（酚：氯仿：异戊醇）重复抽提，使蛋白质变性，然后离心除去变性蛋白质；RNase降解RNA，从而得到纯净的DNA分子。
三、实验材料
新鲜猪肝
TES 缓冲液 ： pH8.0 Tris-HCl 10 mmoL/L , EDTA 1mmoL/ L , SDS 0.1 mmoL/ L
四、实验步骤
1、剪取约0.5g肝脏组织，放入到研钵中磨碎；
2、向研钵中再加入1 ml TES轻轻研磨，将TES与破碎的组织混匀；
3、吸取535 µl组织匀浆液于2 ml EP管中，再加入60 µl SDS（10%），5.0 µl蛋白酶K，充分混匀后，于56°C保温1 h，每30分钟轻摇1次；
4、放置到室温，加入等体积饱和酚（600µl），颠倒混匀，11000 rpm，离心10 min，吸取400 µl水相，并转移至一个新的1.5 ml离心管中；
5、加入2倍体积（1000 µl）的无水乙醇和1/10倍体积（40 µl）3 M 醋酸钠沉淀DNA，12000 rpm离心10 min，弃乙醇；
6、加入适量TE溶解DNA和RNAse A（具体依DNA的多少而定），并利用0.7%的琼 脂溏进行电泳分析。
五、注意事项
1、在将猪肝剪碎前要将猪肝清洗干净，除去脂肪及系膜成分。
2、抽提每一步用力要柔和，防止机械剪切力对DNA的损伤。
3、取上层清液时，注意不要吸起中间的蛋白质层。
4、乙醇漂洗去乙醇时，不要荡起DNA。
5、离心后，不要晃动离心管，拿管要稳。
6、在乙醇沉淀后，经离心要观察留在EP管中的小白点，其主要成分就是DNA，在以后的实验中都要细心观察，防止因将小白点丢失。
六、习题
1、为了获得高质量的肝脏DNA，在实验过程中应注意什么。
2、结合本人操作体会，总结在提取过程中如何避免大分子DNA的降解。
3、核酸提取中，去除蛋白质的方法有哪些？ 实验 限制性内切酶切割DNA
一、实验目的
1． 通过对DNA的酶切，学会设计构建体外重组DNA分子； 2． 根据目的基因合理选择载体与限制性内切酶； 3． 掌握DNA的酶切技术。
二、实验原理
限制性内切酶是从细菌中分离出来的一种能在特异位点切割DNA分子的核酸内切酶，目前已从多种细菌中分离出超过400种，识别各自不同的核苷酸顺序，这一顺序大多为具有一对称中心的回文序列，如从大肠杆菌中分离的 EcoR I识别„GAATTC„ 切割后产生„CTTAAG„、„G 和
AATTC„的末端，„CTTAAG„该末端由于有一段小的能互补配对的单链突出，故称为粘性末端。切割后的末端为3’-OH和5’-磷酸基团，即„G-OH和„CTTAA-P。
有的限制性酶识别四碱基对的顺序，如 San3A识别„GATC „；有的识别六
碱基对，如上述的ECOR I。识别四碱基对的内切酶由于识别顺序在DNA出现的频率更高（四碱基酶为44=256，六碱基酶为46＝4096），因而可将DNA切割成更小的片段，而识别八碱基对的Not I„GCGGCCGC„、„CGCCGGCG„ 则识别和切割位点更少（48＝65536），但碱基并不以均等的概率出现，因而切割后产生的片段变化范围很大。
＋
限制性内切酶作用的温度一般为37℃，反应体系中以Mg2为唯一的辅助因子，且要求pH缓冲在7.5左右。
商品酶都保存在50％的甘油溶液中，-20℃贮存，活性通常较高，5u/μl（每单位即最适条件下1小时内完全酶解1μg DNA的酶量）。
三、实验材料
待酶切的DNA样品
四、实验仪器、器皿及试剂
1、仪器：可调微量加样器、恒温水浴箱、电泳仪、电泳槽、紫外检测灯
2、器皿：Eppendorf管、Tip、试管架
3、试剂：标准DNA(Marker)
EcoRI限制性内切酶
10×buffer：50mmol/l NaCl
10mmol/l Tris-HCl(pH7.5)
10mmol/l MgCl2
lmmol/l
DTT（二硫苏糖醇）
五、实验步骤
1、将DNA样品8.5μl(质粒pEGFP, 1μg)
2、加入1μl 10×buffer，酶解buffer由厂家提供。
3、加入1u（0.5μl）的限制性内切酶EcoRI（限制性酶很昂贵，从-20℃取出要置于冰上，吸取要新的Tip头，以免污染杂质，吸完后尽快放回冰箱）。
4、混匀反应液后，稍离心使液体聚集，置37℃温育１小时。
5、进行电泳检查酶切结果，100V 25分钟。
6、紫外灯下观察消化效果。
六、注意事项
1、分子生物学实验大多为微量操作，DNA样品与限制性内切酶的用量都极少，必须严格注意吸样量的准确性以保证酶切效果最佳。现介绍三种微量取样方法：
(1)吸样时，将Tip尖刚刚接触到液面时，轻轻吸取。此法可吸取0.2~0.5μl的样品，注意不要将Tip尖全部插入溶液，这样Tip壁上会沾上很多的样品，导致吸样不准。
(2)用1cm长的塑料毛细管代替Tip吸样，此法也可吸取0.2~0.5μl的样量。
(3)目前也有细长Tip出售，专门用于吸取微量样品。
2、限制性内切酶价格比较贵，因此要注意不使其污染而导致浪费。这就要求每次吸酶时要用新的无菌Tip。另一个造成限制性内切酶浪费的因素就是限制性内切酶的失活。因此，要注意加样次序，即各项试剂加好后，最后才加酶，并要在冰上操作，且操作要尽可能快，以使限制性内切酶拿出冰箱的时间尽可能短。
若用同一酶消化很多样品时，可先计算出所需酶量（可稍多计一点），取出此量的酶与1×缓冲液混合，然后再分装至各个反应管内。这样可节约用酶且缩短操作过程、减少污染机会。
3、开启Eppendorf管时，手不要接触到管盖内面，以防杂酶污染。
4、样品在37℃与65℃保温时，要注意将Eppendorf管盖严，以防水进入管内造成实验失败。
5、无实验必要应尽量避免长时间酶消化样品。因长时间消化，限制酶溶液中可能存在的杂酶会影响试验结果。
七、习题
1、限制性核酸内切酶天然存在于什么生物体内？
2、什么是细菌的限制-修饰系统？限制-修饰系统对细菌有什么用途？
3、限制性内切酶有几类？这几类限制性内切酶各有什么特点？可作为工具酶的限制性内切酶是哪一类？为什么？
4、限制性内切酶的识别序列有什么特点？称为什么序列？
5、酶通常在什么温度中保存？为什么酶在该温度下保存不会结冻？酶最后工作的时候其甘油浓度必须低于多少？ 6、1个单位（1 U）的限制性内切酶代表什么意思？
实验 质粒的转化
一、实验目的
掌握热激法或电转化法转化大肠杆菌感受态细胞及转化子的鉴定方法。实验材料：质粒DNA；大肠杆菌感受态细胞。
二、实验原理
质粒的转化是指将质粒或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。将连接产物转化到感受态细胞中，实现重组克隆的增殖，便于后续分子操作。可以采用多种方法筛选和鉴定目的克隆。
（1）热激法：大肠杆菌在0℃ CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形，转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基－钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42℃短时间热冲击处理，促进细胞吸收DNA复合物，在丰富培养基上生长数小时后，球状细胞复原并分裂增殖。在被转化的细胞中，重组子基因得到表达，在选择性培养基平板上可挑选所需的转化子。
（2）电转化法：外加于细胞膜上的电场造成细胞膜的不稳定，形成电穿孔，不仅有利于离子和水进入细菌细胞，也有利于孔DNA等大分子进入。同时DNA在电场中形成的极性对于它运输进细胞也是非常重要的。
三、实验步骤
1、制备选择性培养基平板：在融化的250ml LB固体培养基中（冷却止55摄氏度以下）加入Amp至终浓度50μg/ml，混匀后倒入灭菌培养皿中；
2、取出1管制备好的感受态细胞，放在冰上融化；
3、每100μl感受态细胞加入约20ng质粒DNA，轻轻混匀，在冰上放置30分钟；
4、热击：将离心管放置42℃水浴，热击90秒，注意：勿摇动离心管；
5、冰镇：快速将离心管转移至冰浴，放置1－2分钟；
6、复苏：每管加400 μl LB培养基，在37℃摇床温和摇动温育45分钟，使细菌复苏；
7、布皿：取适当体积均匀涂布于含有、抗生素（Amp）的LB平板；
8、培养：倒置培养皿，于37℃培养12－16小时即可观察到白色的菌落，即为转化子。
四、结果与分析
计算转化效率
菌落数/DNA质量（μg）*稀释倍数
五、习题
1、制备感受态细胞的关键是什么？
2、如果DNA转化后，没有得到转化子或者转化子很少，分析原因。
3、如何提高转化效率？
[5] 分子生物学技术支持工作总结
分子生物学它不象人体解剖学那样直观，不象生理学那样有条理化，更不象内外科那样有吸引力.很多医学大学生三羧酸循环学得很好，甚至很精，但对于后面的分子生物学，即基因信息传递一章却感到非常头痛，很多大五学生在考研时考虑到分值较小而干脆放弃对这一章的复习.其实大家只要强制自己静下心来花点时间先认真看好书本上分子生物学的第一章，即DNA的生物合成，当你对这一章看进去了，并且基本上看出了头绪，我相信你一定有信心有兴趣继续看下去，并且最好是连贯性地系统性地看后面的，争取一次性地看完分子生物学这一篇，用通俗的话说就是花大力气啃掉这块硬骨头.如果中途有特殊情况，那么间隔时间最好不要超过两天，否则你前面辛辛苦苦培养出来的兴趣将会消失的一干二净，你又将回到从前讨厌分子生物学的状态.分子生物学理论学习只有通过自己看书理解才能掌握。
除了学习分子生物学理论外，分子生物学实验也很重要，只有通过分子生物学实验才能学到书上学不到的东西。因此，最好在大学阶段进入老师实验室，跟老师研究生学习分子生物学技术，那样才能更好地学好分子生物学理论。
现在分子生物学实验发展非常快，如果只是看书根本掌握不到多少东西，如DNA、DNA提取、PCR、文库构建、测序等，在书上看着很复杂，而且印象还不深刻，如果进入实验室多做几次，其实这些实验是最基础的实验，而且不用看书都能自己做，原理非常复杂或高深难懂，但实际做起来也不是很难。
生命科学发展日新月异，特别是微观生物学的发展速度可谓惊人。作为一名本科生，最重要的就是掌握好基础知识，为今后的科研工作或是研发工作打下基础，这样才能跟得上知识和信息发展的脚步。分子生物学作为微观生物学的根基，学好它无疑将为将来的发展打下最坚实的基础。
最近我读了一篇文献，是有关不同类型的弥散性大B细胞淋巴瘤的基因表达分析的。弥漫型大B细胞淋巴瘤(DLBCL),最常见的非霍奇金淋巴瘤亚型,是在临床上异构的:40% 的患者目前的治疗反应良好,长期生存,而其余屈服于疾病。我们认为这种可变性在自然历史反映了识别分子在肿瘤异质性。两个不同的分子形式的DLBCL有着不同的gene表达模式，表明了B细胞有不同的分化阶段。一种是表达中心B细胞的基因表达特征(中心B细胞类似DLBCL)，另一种是表达体外激活诱导外周血B细胞(激活B细胞类似DLBCL)。其中中心B细胞的存活率大于激活B细胞。我们发现肿瘤的分子分类的基础上的基因表达可以识别以前未被发现和临床癌症的重要亚型。构建了一个特异性的DNA微阵列，分析淋巴恶性肿瘤的基因表达，判断基因表达模型和肿瘤表型，最后利用分层系统树图得出结论。
从文献中我了解了DNA微阵列技术，掌握了DNA微阵列技术的方法，学会了分析分层系统树图，更认识到了弥漫型大B细胞淋巴瘤(DLBCL)研究的重要性。分子生物学是一门前沿的学科，我们只有努力学习英语，经常阅读中外文献，亲自参与到实验中去，才能了解分子生物学最新的研究成果，掌握分子生物学中的研究分析方法。
通过一个学期的分子生物的学习，第一，我掌握了以中心法则为核心的最基本的分子生物学知识
锻炼了专业英语阅读和写作能力，也 接触了微观生物学前沿，培养了一定的科研思维能力。学习分子生物学提高了我们的微观生物学素养，为今后的进一步学习打下了坚实基础，同时了解了最新的微观生物学进展，让我们对生物学科研有了一定的感性认识。
学习生化。我学生化的时候，平时也没怎么看书，基本是考前突击的!因为我知道，像这么抽象的课程，按照我这个记忆水平即使平时看了书，到时候不下工夫复习，一样是什么都不记得的!所以，我利用考前的2个星期突击了一把，感觉效果还可以!我看第一遍书的时候，是把书都通看了一下(不过没有讲的我没有看)，掌握了基本的内容，在看书的过程中，写出一些简要的提纲，我还把一些重要的知识点一边念，一边抄，然后再背着默写一遍，晚上睡觉前反复回忆，结果做梦都是这些东西，呵呵!第二、三遍主要就是根据这些提纲来回忆、复习，忘记的就再看书，不要怕重复，只有这样才记的牢靠!最后一遍书主要是大概看一下课本，把专业英文单词看了一下(因为我们要考20分的英文题目，还要英文回答!)，整理一下思路!
下面就是根据我复习的经验总结的一些重点：三大物质的代谢以及相互转化，这可是重中之重，一定要掌握(尤其是三羧酸循环)!再有就是呼吸链、以及胆色素的代谢!其他的就是掌握一些蛋白质、DNA和酶的一些基本知识!分子生物学的内容主要是DNA、RNA和蛋白质的合成的过程一定要掌握，考试的主要分数都是出在这里!
顺便说一下，我复习生化的时候用的是北医编的一本参考书，是16K，蓝色封面的那本，虽然有的题目比较有难度，但是对于理解一些知识点还是很有帮助的!那本书的名词解释和问答题比较全面，也很细，考试可以参照那本书准备相应的题型!
[6] 分子生物学技术支持工作总结
慕课(MOOC)是大规模开放性在线课程(MassiveOpenOn-lineCourses)的简称，是“互联网+教育”理念下对教学方式的有效探索。在美国迅速崛起，众多知名大学相继推出在线开放课程，开始我国高等院校也加入其中。慕课使得世界范围内的优质教育资源实现了在线共享，适应了信息化时代的发展特点，只要有网络和移动设备(智能手机、平板电脑等)，随时随地都可以学习，开启了“指尖上的学习”新模式，为传统教学的改革创新提供了新的契机。在这种背景下，我们更加需要冷静地分析和大胆的尝试。先来分析一下高等数学课程在高职高专院校的现状。高职高专院校一直致力于培养高技能型人才，因此更加重视专业课和实践性课程，公共基础课程的地位相对比较薄弱。以高等数学课程为例，近几年来我院的高等数学课时被压缩至56学时，绝大部分专业甚至不开设高等数学课程。在这样的大环境下如何在有限的时间内将微积分的基本思想和方法传授给学生;培养学生将专业当中的实际问题转化为抽象数学模型的能力;培养学生了解和使用现代数学语言和符号的能力;为后续课程的学习以及终身学习提供必须、够用的知识储备和能力储备。这些问题一直困扰着一线的数学教育工作者，虽然大家一直致力于教学模式的创新和改革，但是收效甚微，而慕课的出现给这一问题的改善带来了新的希望。
(一)开发技术门槛低。全国高校微课教学比赛对微课的定义是这样的:微课是以视频为主要载体，记录教师围绕某个知识点或教学环节而开展的简短、完整的教学活动。微课的制作中也包含了使用摄像机直接拍摄、使用录屏软件直接录制PPT等简单易操作的方式，使得人人都具备开发微课的能力。
(二)短小精悍。微课的教学视频一般为5－8min，最长不宜超过10min。这是因为前十分钟人的注意力是最集中的，超过十分钟注意力就会逐渐下降。若根据内容需要视频时长超过了十分钟，则可以通过中途插入测试题的方式刺激学生提高注意力。微课的这一特点顺应了“微时代”的潮流，使得学生能够利用碎片化的时间、随时随地进行学习;一次只学一点，学生不会感到厌倦，提高了学习效果，增加了学习信心。
(三)在线开放性。微课借助于互联网进行传播的特性，使得学习的主动权更多更好地掌握在学生手中。学生可以根据自己的兴趣、时间安排、知识储备和学习需求自主选择课程、选择老师。传统课堂教学中，教师只能按照绝大部分学生的学习情况来安排教学进度，容易造成反应慢一些的学生消化不了，跟不上进度;反应快的学生吃不饱，浪费了时间。无论是哪一种情况，都会影响学习效果，降低学生的学习兴趣。而微课的在线开放性使得学生不必被动地在固定的时间被限制在固定的场所，他们可以自由选择学习时间和学习地点;微课还使得学生不必再被迫跟随教师的思维速度，学生在观看微视频的过程中可以根据自己的学习进度选择暂停、快进、回放等操作，对理解不透彻的地方可以反复观看，需要思考的地方可以选择暂停，已经掌握的内容可以选择跳过，这样一来学习过程就会变得更加有趣高效。
(四)实时互动性。除了微视频以外，微课还包含练习测试、在线提问与讨论等环节。学生在学习过程中遇到问题可以在线提问，老师或其他学习者都可以在线解答。传统课堂教学中，有些学生羞于提问，问题长期积累使学习效果大打折扣，学习信心和积极性受到打击。微课这种新型的学习方式使得这部分学生能够没有顾虑地勇敢提问、积极参与讨论和发表意见。这种克服了地域限制的大规模互动也有利于教师更好地了解学生的思维方式、思维误区和学习过程中遇到的困难，从而完善教学设计，制作出更高水准的微课。这种在线互动方式真正实现了师生之间的互相学习和共同进步，教师的角色从讲授者自然转换为激励者和启发者。
为了充分发挥微课的上述优势，使其能够更好地服务于高职院校高等数学教学，我对传统教学活动进行了如下尝试。
(一)精心制作微课资源。高职院校学生无论是在数学知识的积累、良好学习习惯的养成和学习能力等方面都存在不足，因此首先应该制作符合高职院校人才培养目标的，不同于本科的高等数学微课资源。教学设计中应坚持“以应用为目的，以必须够用为度”的原则，淡化理论推导和证明，不强调知识的系统性和逻辑的严密性。
(二)要求学生利用微课做好课前预习。教师提前两天布置学生观看相关微视频，完成在线测试。高职院校学生的学习主动性和自控能力较弱，为了督促学生实实在在地完成上述任务，我们准备了一份针对基本要求的当堂测试卷，以检验任务的完成情况和完成效果，并将测试成绩计入总评成绩。
(三)课堂教学主要完成下列任务。
1．根据学生在线提出的问题和相互讨论的情况，对微课涉及的知识点有侧重地进行补充讲解。例如:微课《复合函数》中虽然列举出了复合函数分解过程中“内外层函数区分不清”、“分解不彻底”的常见错误，但是在线测验的情况反馈出在进行具体复合函数分解时仍然有不少学生会出现这些错误，因此在课堂教学中就需要补充例题，展现更多不同类型函数的复合过程和分解过程，并逐渐增加复合层数，引导学生相互讨论、发现问题并加以纠正。事实证明这样能够很好地实现对基础知识的理解和对基本技能的掌握，为后续学习打下坚实基础。
2．对教学内容进行合理适度的延伸。以《初等函数》这部分内容为例，学生通过观看微视频和完成在线测试完全可以掌握本次课的基本概念和技能。在课堂教学中可以通过介绍取整函数和双曲函数来扩充延伸学生对初等函数的认知。按照认知规律尝试按照如下方式来介绍取整函数。首先让学生先从掌握定义开始，即:“不超过实数x的最大整数称为x的取整函数，记作［x］”，如［3．6］=3．但对于负数学生就容易出现错误，譬如把［－3．6］写成－3，这时就需要引导学生仔细分析定义，自主发现－3超过了－3．6，是不符合定义要求的，［x］指的并不是x小数点左边的部分，正确结果应该是－4．接着将概念延伸至对小数部分的理解。在取整函数中，规定x－［x］称为x的小数部分，记作{x}．例如，{－3．6}的小数部分不是－0．6，事实上{－3．6}=－3．6－(－4)=0．4．这样的规定与一般思维有所不同，计算这样的题目非常容易出错，借此能够扩展学生的思维。最后向函数图像、定义域、单调性延伸。让学生画出函数图像，再延伸讨论取整函数的性质:y=［x］的定义域是(－∞，+∞)，函数在定义域内单调递增且无界。在微课的讨论区已经发布了题目:认知双曲函数。课堂上对学生的回答进行整理归纳和补充。首先介绍双曲函数与悬链线的关系，解释为什么叫双曲函数;接着将双曲函数与三角函数进行对照，介绍其性质与恒等式;最后通过欧拉公式揭示两种函数之间的关系。希望通过对取整函数和双曲函数的学习，能够让学生从常见函数的惯性思维中脱离出来，认识到初等函数在实际中更加广泛的应用，提高学生应用数学知识解决实际问题的能力。
3．扩展学生视野。以《导数的概念》这部分内容为例，通过上述两个步骤，学生对导数的定义、几何意义的认知已经达到了一定的高度，接下来可以通过介绍魏尔斯特拉斯函数(Weierstrassfunction)来拓宽学生视野。在高等数学中，魏尔斯特拉斯函数是一种处处连续但又处处不可导的实值函数。因为处处不可导，所以画其图像时无法知道每一点该朝哪个方向画，因此它是一种无法用笔描绘出任何一部分图像的函数。将魏尔斯特拉斯函数在任一点放大，所得到的局部图形都和整体图形相似。因此，无论如何放大，函数图像都不会显得更加光滑，也不存在单调的区间。由魏尔斯特拉斯函数图形的这种自相似性(局部形态与整体形态相似)还可以进一步延伸至“分形(Fractal)”的概念，结合生动的图片介绍雪花图案、谢尔宾斯基三角形、皮亚诺曲线、罗马花椰菜等分形，让学生初步接触“分形几何”，并对其产生兴趣和继续学习的欲望。通过对魏尔斯特拉斯函数这个著名数学反例的介绍，改变学生对连续函数的直觉认识———连续函数的不可导点是有限的，加深学生对函数连续性、可导性的理解。
4．培养学生的应用能力。以机电专业为例，借助图解和解析法设计盘形凸轮轮廓涉及导数的概念、二阶导数和定积分;晶体管放大电路和带电源的简易函数发生器设计涉及导数概念、极值概念和定积分;圆轴扭转时横截面上的应力和强度条件的计算涉及微分的概念及其近似计算;剪力图与弯矩图涉及函数极值和曲线的凹凸性;梁的变形的计算、压杆的临界载荷涉及二阶常系数线性微分方程;连续量的力矩的计算涉及定积分的计算及微元法。通过实际问题的解决来提高学生运用数学知识和数学思想解决实际问题的能力。
(四)指导学生利用微课做好课后复习巩固工作。课堂教学结束后，若对某个知识点还存在疑问，学生可再次观看微视频;若有兴趣继续深入学习，教师可推荐学生参加其他相关微课的学习。这使得学习过程更加个性化、多元化。实践证明，这一流程很好地实现了微课对传统课堂教学的辅助作用。既发挥了微课资源的开放性和共享性、学习方式的灵活性和自主选择性、强大的互动性;又发挥了传统课堂进度有序可控、促进情感交流、培养团队合作精神和人际交往能力的功能。教师真正从知识的传授者转向了学习的指导者，从课程的实施者转向了课程的设计者;学生从被动学习转向了自主学习，合作学习。总之，尽管慕课这一新型教学模式仍然处于不断完善的发展阶段，但是毋庸置疑其对高职院校教学方式已经产生了颠覆性的影响。作为一线教育工作者，我们应该与时俱进，以服务和方便学生学习为目标，积极探索其在高职教育实践中的应用，推进高职院校高等数学课程的教学改革。
参考文献:
［1］刘万辉．微课开发与制作技术［M］．高等教育出版社，2015(1)．
［2］杨月梅，陈忠民，庞淑萍．慕课平台在高等数学教学中的应用［J］．教育探索，2015(8):140－142．
［3］袁逸，陈思文．慕课浪潮对高职教育的影响及应对策略［J］．常州信息职业技术学院学报，2016(6):8－10．
[7] 分子生物学技术支持工作总结
盛望
导师基本情况：
盛望，北京市特聘教授，生物医学工程专业博士生导师。出生于1968年5月。1994年赴法国留学，并与1996年和2001年分别获得里昂第一大学病毒学硕士和病毒博士学位。2001－2005年在加拿大多伦多大学进行博士后研修。2005年10月受聘北京工业大学生命科学与生物工程学院特聘教授。
主要研究方向：
1. 病毒在肿瘤的发生和发展中的作用，及抗病毒药物和疫苗的'研究。
2. 干细胞的分化。
课题基金：
获得北京市自然科学基金和北京市教委基金的资助
部份论文：
1.Sheng W, Wang G, La Pierre DP, Wen J, Deng Z, Wong CK, Lee DY, Yang BB. (2006) Versican Mediates Mesenchymal-Epithelial Transition. Mol Biol Cell. Apr;17(4):2009-20.
2.Sheng W, Wang G, Wang Y, Liang J, Wen J, Zheng PS, Wu Y, Lee V, Slingerland J, Dumont D, Yang BB.. (2005) The roles of versican v1 and v2 isoforms in cell proliferation and apoptosis. Mol Biol Cell. Mar;16(3):1330-40.
3.Sheng W., Bouguermouh A., Bouzid M., Djennaoui D. and Ooka T. (2004) BAM HI DNA Fragment H-Polymorphism of Epstein-Barr Virus is Associated with the Mutations Present in an 89 BP Sequence Localized in EBNA2 Gene. Virus Genes. Aug; 29(1): 99-108.
4.Sheng W., Decaussin G., Ligout A. and Ooka T. (2003) BARF1 gene encoded by Epstein-Barr virus contributes to the malignant phenotype and to apoptosis resistance in Burkitt's lymphoma cell line Akata. Journal of Virology, 77(6): 3859-65.
5.Sheng W., Decaussin G., Sumner S. and Ooka T. (2001) N-terminal domain of BARF1 gene encoded by Epstein-Barr virus is essential for malignant transformation of rodent fibroblasts and activation of BCL-2. Oncogene 20 (10): 1176-1185.
6.Wu Y. Sheng W. Cheng L Dong H., Lee V., Lu F., Wong C.S., Lu W. Y. and Yang B.B (2004) Versican V1 isoform induces neuronal differentiation and promotes neurite outgrowth. Mol Biol Cell. May; 15(5): 2093-104.
7.Wu Y., Chen L., Cao L., Sheng W. and Yang B.B. (2004) Overexpression of the C-terminal PG-M/versican domain impairs growth of tumor cells by intervening in the interaction between epidermal growth factor receptor and beta1-integrin. J Cell Sci. May 1; 117(Pt 11): 2227-37.
8.Zheng P. S., Wen J. P., Ang L. C., Sheng W., Viloria-petit A., Wang Y., Wu Y. Kerbel R. S.and Yang B.B. (2004) Versican/PG-M G3 domain promotes tumor growth and angiogenesis. FASEB J. Apr; 18(6): 754-6.
9.Kiani C., Chen L., Lee V., Zheng P.S., Wu Y., Cao L., Adams M.E., Sheng W. and Yang B.B. (2003) Identification of the motifs and amino acids in aggrecan G1 and G2 domains that inhibit product secretion. Biochemistry. Jun 17; 42(23): 7226-37.
10.Guo X., Sheng W., Zhang Y. Malignant transformation of monkey kidney epithelial cell induced by EBV BARF1 gene and TPA. . (2001) Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi. Dec; 15(4): 321-3. Chinese.
11.Bouzid M., Sheng W., Buisson M., Bouguermouh A., Morand P., Seigneurin JM and Ooka T. (1998) Different distribution of H1-H2 Epstein-Barr virus variant in oropharyngeal virus and in biopsies of Hodgkin's disease and in nasopharyngeal carcinoma from Algeria. International Journal of Cancer 77(2): 205-210.
联系方式：
Email: shengwang@bjut.
[8] 分子生物学技术支持工作总结
摘要：钾离子通道是植物钾离子吸收的重要途径之一。近年来，已从多种植物或同种植物的不同组织器官中分离到多种钾离子通道基因，包括内向整流型钾离子通道基因(如OsAKT1，DKT1，Ktrrl，KIll，KZM1，ZMK2等)和外向整流型钾离子通道基因(如CORK，PTORK ，STORK 等)。文章分别从结构、功能以及相关基因等三方面综述了关于植物钾离子通道的分子生物学研究进展，并对应用生物工程技术改良植物的钾营养性状进行了讨论。
关键词：钾离子通道；结构；基因
离子通道(ion channe1)是跨膜蛋白，每个蛋白分子能以高达l08个／秒的速度进行离子的被动跨膜运输，离子在跨膜电化学势梯度的作用下进行的运输，不需要加入任何的自由能。一般来讲，离子通道具有两个显著特征：
一是离子通道是门控的，即离子通道的活性由通道开或关两种构象所调节，并通过开关应答相应的信号。根据门控机制，离子通道可分为电压门控、配体门控、压力激活离子通道。
二是通道对离子的选择性，离子通道对被转运离子的大小与电荷都有高度的选择性。根据通道可通过的不同离子，可将离子通道分为钾离子(potassium ion，K )通道、钠离子(natrium ion，Na )通道、钙离子(calcium ion，Ca2 )通道等。其中，K 通道是种类最多、家族最为多样化的离子通道，根据其对电势依赖性及离子流方向的不同，可把K 通道分为两类：①内向整流型K 通道(inward rectifier K channel；Kin)，② 外向整流型K 通道(outward rectifier Khannel；K out)。K 是植物细胞中含量最为丰富的阳离子，也是植物生长发育所必需的唯一的一价阳离子，它在植物生长发育过程中起着重要的作用，具有重要的生理功能。植物中可能存在K 通道，这一点早在20世纪6o年代植物营养学界就有人提出，而一直到80年代才被Schroeder等人[23证实，他们利用膜片钳(patch chmp)技术，首先在蚕豆(V／c／afaba)的保卫细胞中检测出了K 通道钾离子通道的结构单个钾离子通道是同源四聚体，4个亚基(subunit)对称的围成一个传导离子的中央孔道(pore)，恰好让单个K 通过。对于不同的家族，4"亚基有不同数目的跨膜链(membrane。span。ning element)组成。两个跨膜链与它们之间的P回环(pore helix loop)是K 通道结构的标志2TM／P)，不同家族的K 通道都有这样一个结目前从植物体中发现的K 通道几乎全是电压门控型的，如保卫细胞中的K 外向整流通道等，其结构模型如图2一a所示。离子通透过程中离子的选择性主要发生在狭窄的选择性过滤器(selectivity filter)中(图2一b)，X射线晶体学显示选择性过滤器长1．2 nIll，孔径约nIll，K钾离子通道的作用.有关K 通道在植物体内的`作用研究并不多。
从目前的结果来看，认为主要是与K 吸收和细胞中的信号传递(尤其是保卫细胞)有关。小麦根细胞中过极化激活的选择性内流K 通道的表观平衡常数Km值为8．8 mmol／L，与通常的低亲和吸收系统Km值相似[ 。近年来，大量K 通道基因的研究表明，K 通道是植物吸收转运钾离子的重要途径之一。保卫细胞中气孔的开闭与其液泡中的K 浓度有密切关系。质膜去极化激活的K 外向整流通道引起K 外流，胞质膨压降低，导致气孔的关闭。相反，质膜上H．ATPase激活的超极化(hyperpolarization)促使内向整流钾离子通道(K in)的打开，引起K 的内流，最终导致气孔的张开钾离子通道相关基因及其功能特征迄今，已从多种植物或同种植物的不同组织器官中分离得到多种K 通道基因(图3)，根据对其结构功能和DNA序列的分析，可以把它们分为5个大组：工，Ⅱ，Ⅳ组基因属于内向整流型通道；m组属于弱内向整流型通道(weakly inwardAKT1Arabidopsis K Transporter 1)是第一个克隆到的植物K 通道基因，采用酵母双突变体互补法从拟南芥cDNA文库中筛选出来cDNA序列分析表明，AKT1长2 649 bp，其中的阅读框为2 517 bp，编码838个氨基酸残基组成的多肽，相对分子质量约为95 400 Da。AKT1编码的K 通道，对K 有极高的选择性，其选择性依次是K >Rb >>Na >Li 。
[9] 分子生物学技术支持工作总结
工资待遇
截止到 12月24日，43041位生物化学与分子生物学专业毕业生的平均薪资为4341元，其中10年以上工资1000元，0-2年工资3747元，应届毕业生工资3941元，3-5年工资4529元，6-7年工资7410元，8-10年工资7985元。
招聘要求
针对生物化学与分子生物学专业，招聘企业给出的工资面议最多，占比100%;不限工作经验要求的最多，占比57%;本科学历要求的最多，占比42%。
就业方向
生物化学与分子生物学专业学生毕业后可在科研机构、高等学校从事生物化学、分子生物学和生物工程方面的科研、教学工作，也可到企业单位和行政管理部门从事与生命科学有关的应用研究、技术开发、生产和行政管理等工作。
就业岗位
销售工程师、销售代表、技术支持、技术员、销售经理、区域销售经理、研发工程师、销售助理、区域经理、销售区域经理、实验员、销售专员等。
城市就业指数
生物化学与分子生物学专业就业岗位最多的地区是北京。薪酬最高的地区是温州。
就业岗位比较多的城市有：北京[983个]、上海[948个]、广州[368个]、武汉[237个]、南京[194个]、杭州[182个]、苏州[164个]、深圳[157个]、成都[101个]、天津[95个]等。
就业薪酬比较高的城市有：温州[5665元]、惠州[5427元]、北京[5324元]、上海[5065元]、烟台[5000元]、株洲[4999元]、潍坊[4642元]、杭州[4626元]、南京[4623元]、天津[4604元]、深圳[4520元]等。
同类专业排名
生物化学与分子生物学专业在专业学科中属于理学类中的生物科学类，其中生物科学类共12个专业，生物化学与分子生物学专业在生物科学类专业中排名第3，在整个理学大类中排名第13位。
在生物科学类专业中，就业前景比较好的专业有：医学信息学，生物信息学，生物化学与分子生物学，生物技术，生物安全，动物生物技术，生物科学，生物信息技术，植物生物技术等。
[10] 分子生物学技术支持工作总结
【摘要】在初中阶段，英语阅读课占主导地位，英语阅读能力尤为重要，而阅读理由的设计又直接影响阅读效果。
笔者针对阅读课中理由设计的重要性、设计的原则以及理由的分类，阐述如何在阅读课上科学的设计理由：包括理由明确具体、有计划性、有启发性、有多样性、有阶梯性、有度。
以此来体现阅读课教学的实效性，从而提高初中生的英语阅读能力。
在初中英语教学中，阅读课已占据主导地位，它直接关系到学生的阅读能力和效果。
目前，在我国，初中阶段的英语教学过程中，存在以下理由：教师没能在课堂上给学生提供充足的深思理由的时间;教师直接公布答案多，
分析理由过程少;优秀生回答理由相对过多，中等及中等以下学生回答理由相对过少;理由的设置没能引导学生积极参与课堂活动、引发学生积极深思的阅读习惯等等。
基于上述理由，在本篇论文中，笔者主要针对初中英语阅读课上，如何科学合理地设计理由进行研究。
之前，也有很多学者进行了系统性的研究，提出了一些策略和策略。
本课题结合了前人的经验，又提出了一些个人的观点，以改善初中英语阅读课教学。
英语阅读课的目的是教会学生阅读策略和阅读技巧，有目的的阅读材料，获取其中的相关信息，并对所获取的信息进行分析，归纳，进行信息重组，以此来理解文章的内容。
因而，在阅读教学中，理由的设计极为关键。
好的理由可以让学生大大受益。
科学、合理及巧妙的设计理由会更大限度的理解文章的内涵，提升学生的学习兴趣，引发学生积极主动的深思，进而提高课堂阅读的效率，从而达到优化课堂的效果。
教师在课堂教学中，应重视理由的设计，把学生引入理由情境，引导他们积极深思，提高学生的语言综合运用的能力。
由此可见，学生学习英语的过程中，阅读能力尤为重要，而理由的设计又直接影响阅读的效果。
因此，笔者通过对初中英语阅读课的理由设计进行研究，希望提高学生的阅读能力。
教师设计课堂上所提的理由，必须围绕教学目标，为完成本堂课的教学任务服务。
备课时要认真钻研教材，紧紧围绕重点、针对难点、扣住疑点，避开随意性、盲目性和主观性。
教师设计理由时应分出层次，力争让不同层次的学生在不同程度上有所发展，从而实现因材施教的原则。
知识的掌握、学生能力的培养是一个由少到多、由浅入深、由易到难逐步积累的过程。
提问的设计要遵循由浅入深，由易到难，循序渐进。
教师在理由的设计过程中，充分了解学生的实际情况，正确认识学生并科学地估计他们的知识和智力水平，真正做到从学生实际出发，理由设计要有“弹性”。
至于初中英语阅读课教学理由的分类，从阅读材料本身来看，“理由大致分为以下三类：认知类理由，分析类理由及评价类理由。
认知类理由相对来说比较容易，理由的一般针对句子的表层意思，学生只需读懂字面意思，就能准确的回答理由，不必考虑句子之间的衔接关系以及段落之间的内在联系，
这类理由只要通过快速阅读或浏览就能把握文中事实和细节，从阅读材料中找出正确答案。
这类练习可训练学生又快又准的获取信息的能力。
与认知类理由相比，分析类理由难度上升，不仅要求学生掌握句子的表层意思，更能挖掘句子的深层含义，并考察学生理解、分析理由的能力。
回答分析理由时，既要理解句子的字面意思，而且能理解句子的隐含之意，并运用文中的语言线索进行分析、重组和归纳，根据上下文揣摩真正的含义，这种练习可以训练学生分析、推理和归纳的能力，是阅读能力提升的重要手段。
关于评价类理由，要求学生根据阅读材料中的相关内容，结合自身的认识和看法，围绕阅读材料中的理由表达自己的观点。
这类理由不仅是对学生思维能力的考察，也是对学生语言能力的检验，难度大，层次高。
基于以上三种分类，教师在设计理由的时候一定要多加深思，巧妙、科学的进行设计。
而从学情来看，教师应根据学生的情况来设计理由。
在一个班级中，学生的层次大不相同，因此，在设计理由的时候应照顾到每一位学生，让所有的学生都参与到课堂活动中，才能体现课堂教学的实效性。
阅读理由的设计要符合学生的水平，能为学生理解，让学生有思路可循，切不可含糊不清，影响学生的阅读效果。
教师在设计理由前，要仔细备课，认真研读阅读材料，之后精心设计理由。
而且，对于同样一个理由，可能会有几个答案，这就要求教师深思如何进行正确的引导，如何训练学生的多角度的深思理由的能力。
教师在设计理由时，要考虑理由的提出会训练学生的思维能力，让学生在深思后得出答案，从而，让学生在课堂上养成动脑的好习惯，积极参与深思理由的教学活动中，进而，提高英语的阅读能力。
为了更好的理解一篇文章，阅读理由的设置要灵活多样，在教学过程中，可设置选择题，问答题，判断正误题，填充表格题等等，全方位、多角度的训练学生的阅读能力。
首先，阅读理由的设计应难易结合，因为我们学生的层次参差不齐，这样题型的设置会让全体同学都参与到课堂活动中来，而不是只关注某几个学生。
这样的教学手段会推动所有同学学习的动力，积极投入课堂活动，认真完成学习任务。
其次，阅读理由的设计应层层递进，先设计一些铺垫性的理由，逐渐深入，提出揭示文章主题的理由，由浅入深，一环扣一环，达到理解文章深层含义的目的。
理由的设计要把握好度，难度、深度和广度。
科学的设计理由，可以激发学生的求知欲，调动学生的注意力，让学生体会到学习和深思的快乐，同食也激发学生的思维能力，提升英语的综合能力。
初中英语阅读教学中，理由设计尤为关键。
在理由设计与实施的环节，应根据学情，设计好每一个理由。
理由的设计要明确具体，有计划性，有启发性，有多样性，有阶梯性，有度。
要符合学生的水平，要精心设计、深思理由，要注重学生思维能力的培养，理由的形式要灵活多样，理由要难易结合、鼓励全员参与，要把握好难度、深度和广度。
理由之间应有联系，层层递进，环环相扣。
遵循着这样的设计模式，应用于教学实践，实现对阅读课教学的改善。
参考文献：
〔2〕范煜华 精心设计课堂提问，提高课堂教学效率 中小学外语教学 .6
〔3〕高艳琳 中学英语课堂教师话语的调查与研究〔A〕中小学英语教学与研究 〔J〕2002-09
〔5〕徐育兵 课堂提问初探〔A〕中小学英语教学与研究 〔J〕-05
[11] 分子生物学技术支持工作总结
一 目的基因的获得 细菌基因组DNA的提取
（一）仪器 1）台式高速离心机 2）恒温水浴箱 3）枪式移液器 4）灭菌的EP管和Tip头
（二）试剂
1）溶液1: 25% 蔗糖
50mmol/L Tris-Hcl，pH8.0 50mmol/L
EDTA，pH8.0 500ug/ml
溶菌酶（现用现配）
100ug/ml
RNase 2)溶液Ⅱ：100mmol/L
Tris-Hcl，pH8.0
1%
SDS
400ug/ml
蛋白酶K 3）酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）4）氯仿：异戊醇（24：1）5）3mol/L NaAc(pH5.2)6）异丙醇或无水乙醇 7）70%乙醇
8)TE缓冲液： 10mmol/L
Tris-Hcl，pH8.0
1mmol/L
EDTA，pH8.0(三)实验步骤
1)5mL细菌过夜培养，5000rpm离心10分钟，去上清液。2）将菌体细胞悬于250uL溶液1中，37°C水浴保温过夜。3）加250uL溶液Ⅱ，55°C水浴保温4小时。
4）加0.9倍体积的酚/氯仿/异戊醇（25：24：1），轻轻混匀，于14000rpm离心10分钟，转移水相至新的Ep管，重复步骤4一次。
5）向转移的水相中加入0,9倍体积的氯仿/异戊醇（24：1），轻轻混匀，于14000rpm离心10分钟，转移水相至新的Ep管，重复步骤5一次。
6）向转移的水相中加入0.1倍体积的3mol/L NaAc和0.7倍体积的异丙醇（或2.5倍体积的无水乙醇），冰上放置30分钟。
7）14000rpm离心20分钟，弃上清，用0.5mL70%乙醇洗涤沉淀一次，弃上清，沉淀于室温干燥。
8）将DNA沉淀溶解于15ul TE缓冲液中，-20°C保存。9）进行DNA含量和纯度检测，琼脂糖凝胶电泳鉴定。
植物DNA的SDS提取法：
（一）试验试剂：
1）研磨缓冲液：称取59.63gNaCl，13.25g柠檬酸三钠，37.2gEDTA－Na分别溶解后合并为一，用0.2mol/L的NaOH 调至pH7.0，并定容至1000ml。
2）10 SSC溶液：称取87.66gNaCl 和44.12g柠檬酸三钠，分别溶解，一起定容至1000ml。3）1 SSC溶液：用10 SSC溶液稀释10倍。4）0.1 SSC溶液：用1 SSC溶液稀释10倍。
5）Rnase溶液：用0.14mol/LNaCl 溶液配制成25mg/ml 的酶液，用1mol/LHCl，pH至5.0，使用前经80℃水浴处理5min（以破坏可能存在的Dnase）。6）氯仿－异戊醇：按24ml 氯仿和1ml 异戊醇混合。
7）5mol/L高氯酸钠溶液：称取NaClO4．H2O 70.23g，先加入少量蒸馏水溶解再容至100ml。8)SDS（十二烷基硫酸钠）化学试剂的重结晶：将SDS放入无水酒精中达到饱和为止，然后在70～80℃的水浴中溶解，趁热过滤，冷却之后即将滤液放入冰箱，待结晶出现再置室温下凉干待用。9)1mol／LHCl。10)0.2mol/LNaOH。
11)二苯胺乙醛试剂：1.5g二苯胺溶于100ml 冰醋酸中，添加1.5ml 浓硫酸，装入棕色瓶，贮存暗处，使用时加0.1ml 乙醛液［浓乙醛：H2O＝1：50（V／V）］。12)1.0mol/L高酸溶液（HClO4）。13)0.05mol/LNaOH。
14)DNA标准液：取标准DNA25mg 溶于少量0.05mol/L NaOH中，再用0.05mol/LNaOH定容至25ml，后用移溶管吸取此液5ml 至50ml 容量瓶中，加5.0ml1mol/LHClO4，混合冷却后用0.5mol/LHClO4定容至刻度，则得100μg/ml 的标准溶液。
（二）实验步骤： 1)称取植物幼嫩组织10g剪碎置研钵中，加10ml 预冷研磨缓冲液并加入0.1g左右的SDS，置冰浴上研磨成糊状。
2)将匀浆无损转入25ml 刻度试管中加入等体积的氯仿－异戊醇混合液，加上塞子，剧烈振荡30s，转入离心管，静置片刻以脱除组织蛋白质。以4000rpm离心5min。
3)离心形成三层，小心地吸取上层清液至刻度试管中，弃去中间层的细胞碎片、变性蛋白质及下层的氯仿。
4)将试管置72℃水浴中保温3min（不超过4min），以灭活组织的DNA酶，然后迅速取出试管置冰水浴中冷却到室温，加5mol/L高氯酸钠溶液［提取液：高氯酸钠溶液＝4：1（V／V）］，使溶液中高氯酸钠的最终浓度为1mol/L。
5)再次加入等体积氯仿－异戊醇混合液至大试管中，振荡1min，静置后在室温下离心（4000rpm）5min，取上清液置小烧杯中。
6)用滴管吸95％的预冷乙醇，慢慢地加入烧杯中上清液的表面上，直至乙醇的体积为上清液的两倍，用玻璃棒轻轻搅动。此时核酸迅速以纤维状沉淀缠绕在玻璃棒上。7)然后加入0.5ml 左右的10 SSC，使最终浓度为1 SSC。8)重复第6步骤和第7步骤即得到DNA的粗制品。
9)加入已处理的Rnase溶液，使其最后的作用浓度为50～70μg/ml，并在37℃水浴中保温30min，以除去RNA。
10)加入等体积的氯仿－异戊醇混合液，在三角瓶中振荡1min，再除去残留蛋白质及所加Rnase蛋白，室温下以4000rpm离心5min，收集上层水溶液。11)再按6、7步骤处理即可得到纯化的DNA液。
二、PCR扩增目的基因
(一)器材 1)微量移液器
2)灭菌的Tip头、PCR管 3)PCR扩增仪
4)目的DNA（DNA模板）5)dNTP混合物 6)引物对 7)Tap酶
8)PCR扩增试剂盒
（二）试剂
1）10×PCR 缓冲液（含Tris-HCl 100mmol/L;MgCl2 15mmol/L、KCl 500mmol/L, pH8.3，0.1%明胶）
2)脱氧核苷三磷酸dNTPs：配成 10mM—— dATP，dTTP，dGTP，dCTP各10mM，用NaOH溶液调节至pH8.3。）
3）氯仿-异戊醇：配成24：1的比例，室温避光保存。4)酚：氯仿：异戊醇=25：24：1 5)3M NaAc、ddH2O 6)无水乙醇：70%乙醇 7)TE缓冲液
（三）实验步骤
1）在0.2ml薄壁反应管中加入下列成份：（混匀）
ddH2O: 补至终体积（25μl）10×PCR缓冲液 1/10总体积 2.0mM dNTPs 1μl
2U/μl Taq DNA聚合酶 0.5μl
引物混合液（10 pmol /μl /引物）1μl
DNA模板 0.6μl
混匀后，在台式离心机上瞬时离心10秒。2）在设定好的PCR仪上反应 95°C，5min；95°C，1min；56°C，1min；72°C，2min。反应30轮。
3）反应结束后，将反应管在72°C充分延伸10分钟，再将反应管冷却至4°C。取一部分反应液进行琼脂糖凝胶电泳(实验三)，确认是否有目的的PCR产物。如果PCR产物纯度较低或反应液中含有连接反应阻碍物，可以通过纯化得到改善。纯化继续4）—6）。4）转至1.5ml离心管，向管中加25μl酚，25μl氯仿-异戊醇混匀，离心10000rpm，30秒。5）吸取上层液，转至另一已加5μl 3M NaAc的1.5ml的离心管，加150μl无水乙醇，-20°C过夜。
6）离心10000rpm，10分钟，弃上清，加0.5ml 70%乙醇，10000rpm离心，5分钟。弃上清，烤箱中干（60°C），溶于20μl TE。
（四）技术要点
1）PCR各组份的配制与加样量要特别注意。
(1)引物浓度：10 pmol 足够30个循环，浓度太高导致与模板非特异结合增强，扩增非 特异片段增多，浓度太低则扩增效率低。
(2)引物的配制：厂家提供的引物一般是干粉状态并标明OD值，1 OD约含33μg。开盖前先将干粉离心至管底，加双蒸水至浓度2μg/μl，再取部分稀释至10 pmol /μl。引物浓度计算公式：1pmol=(3.3×10μg)×n，n是引物的碱基数
(3)Mg：使用浓度一般在1.5mM，要求模板不含高浓度EDTA和诸如硫酸基团类的负电荷基团，Mg浓度升高可导致错配率升高和非特异性扩增。
(4)模板DNA：浓度不可过高，质粒DNA 20ng即可，若需第二次扩增，可将第一次扩增产物稀释1000-10000倍作为模板使用。
(5)Taq DNA聚合酶：一般用量5U/100μl。酶量过大易导致扩增非特异序列，Taq酶具有末端转移酶活性，常在3’端加A。2）扩增轮数与退火温度
扩增轮数：一般30轮以内就可使模板扩增10倍，超过30轮，错配率升高。退火温度计算公式：Tm值=（GC×4+AT×2）–4
6-42+2+
三、琼脂糖凝胶电泳的检测
(一)仪器
1）琼脂糖凝胶电泳系统（天平、锥形瓶、量筒、微波炉、凝胶板、梳子、枪式移液器、灭菌Tip头、水平电泳槽、电泳仪）2）凝胶成像仪(二)试剂及材料
目的DNA、琼脂糖、蔗糖、溴酚蓝、硼酸、Tris、EDTA、EB、DNA纯化试剂
盒
1)TAE电泳缓冲液
浓储存液 50×：242g Tris；57.1ml冰乙酸；100ml 0.5mol/L EDTA(PH8.0)
定容至一升。
使用液 1×：4.84g Tris；1.15ml冰乙酸；2ml 0.5 mol/L EDTA(PH8.0)定容至一升。2）样本液
10×缓冲液: 60%蔗糖；0.4%溴酚蓝
（三）实验步骤
1）将有机玻璃内槽洗净、晾干，放置于水平制胶器中，插好梳子，在梳子底部与胶槽之间应保持几毫米的间隙。
2）0.8%琼脂凝胶板的配制：取0.6g琼脂糖加80ml TAE（1×），20ml水，微波炉加热融化3分钟，将其冷却至55°C-65°C，加入EB储存液1ul，小心混匀，缓慢倒入制胶槽中。（根据目的基因的大小选择琼脂糖凝胶浓度）。
3）充分凝固后从制胶槽中卸下凝胶板，放入电泳槽，加入TAE（1×），使其液面略高于琼脂糖板，拨出样品梳。
4）DNA样品按照10：1的比例加入样本液，在腊面纸上混匀，用移液枪加样于琼脂糖板的样品孔中。同时另取一个DNA分子量标准上样于另一样品孔，在同一凝胶板上进行电泳。5）接通电泳槽与电泳仪的电源，维持稳压1-5V/cm（按照两极之间距离计算），电泳时间根据溴酚蓝指示剂迁移的位置来判断，当移动到距凝胶前沿1-2cm出停止电泳。6）剥胶并在凝胶成像仪观察结果。（四）技术要点
1）选择琼脂糖凝胶浓度取决于所鉴定DNA的大小，小片段DNA应用高浓度凝胶，大片段则用低浓度凝胶，在1%的琼脂糖凝胶中溴酚蓝的泳动速度与500bp的双链线状DNA一致。不同浓度琼脂糖凝胶及其可分离的线性DNA大小范围见下表1。表1 不同浓度琼脂糖凝胶及其分离线性DNA分子的有效范围凝胶浓度（%）
0.3 0.6 0.8 1.0 1.2 1.5 2.0 2）电泳中注意防止凝胶发热。
3）将电泳仪置稳压档，电压设置小于5V/cm（电极间的最小路径）。随着电压的增加，琼脂
糖凝胶的有效分离范围缩小。
4）溴化乙锭有强烈的致癌作用，操作时注意防护。
60～5 20～1 10～0.8 7～0.5 6～0.4 3～0.2 2～0.1
分离DNA的有效范围（kb）
四、目的DNA的回收纯化
(一)仪器
1）琼脂糖凝胶电泳系统 2）凝胶成像仪 3）离心机 4）单面刀片 5）恒温水浴锅(二）试剂
1）DNA回收试剂盒 2）50×TAE 3）ddH2O(三)实验步骤
1）在紫外灯下切分含DNA的琼脂糖块，尽可能除去多余的琼脂糖．放入1.5ml离心管中。2）按每100mg琼脂糖加入300—600μl 溶胶液的比例加入溶胶液（本实验加500ul），置55℃水浴10分钟，使琼脂糖块完全溶化，期间每2分钟颠例混匀一次促溶。3）将溶化后的琼脂糖液移入吸附柱，12000rpm 室温离心1分钟，倒掉收集管中的液体．再将吸附柱放入同一个收集管中。
4）在吸附杜中加入500uI漂洗液，室温静置1分钟后，12000rpm 室温离心30秒，倒掉收集管中的液体，将吸附柱放入同一个收集管中。
5）再在吸附柱中加入500uI漂洗液，12000rpm 室温离心15秒，倒掉收集管中的液体，将吸附柱放入同一个收集管中。6）12000rpm 室温空离心1分钟。
7）将吸附柱放入一个干净的1.5ml的离心管中，在吸附膜中央加入30ul洗脱缓冲液，室温静置2分钟后，12000rpm 室温离心1分钟（为提高回收效率可再洗脱一次），将1.5ml离心管(DNA)贮存于-20℃。
五、限制性内切酶消化、产物回收及连接重组
(一)仪器及材料 1）回收得到的目的DNA
2）BamHI、HindIII、T4 DNA连接酶、DNA回收试剂盒 3）pUC18‐CAT 质粒、双蒸水、10×酶切通用缓冲液K 4）EP管、恒温水浴锅、微量移液器、台式离心机
表1 常用酶切缓冲液配方
缓冲液名称
配 方
10×L
100mM
Tris-HCl,pH7.5 100mM MgCl
210 mM DTT 10×M
100mM
Tris-HCl,pH7.5 100mM MgCl2mM DTT 500mM NaCl 10×H
500mM
Tris-HCl,pH7.5 100mM MgCl2mM DTT 1000mM NaCl 10×K
200 mM Tris-HCl,pH8.5 100 mM MgCl2mM DTT 1000mM KCl 10×T（BSA－Free）
330mM
Tris-Ac,pH7.9 100mM MgAc 5 mM DTT 660mM KAc
0.1% BSA 0.1% Trition X-100
贮存温度（℃）-20
-20-20
(二）实验步骤
1）在灭菌的EP管中按如下方式准备双酶切反应体系： 酶切反应体系（20ul体系）
管号 核酸 10×酶切通用缓冲液K ddH2O BamHI
HindIII 1 15ul目的DNA
2ul
0ul
2ul
1ul 2
10ulpUC18‐CAT质粒 2ul 5ul 2ul 1ul 2)37℃保温三小时。
3)酶切产物的纯化回收，每100ul溶液加入700ul溶胶液，其余的操作步骤详见实验四 4)载体与目的DNA的连接。在灭菌的EP管中按如下方式准备双酶切反应体系（20ul）： 目的DNA pUC18‐CAT质粒 10×连接缓冲液 T4 DNA连接酶
ddH2O
X ul
Y ul
-
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2ul
1ul
Zul 目的DNA和pUC18‐CAT质粒的相对浓度约为1:3—1:10 5）14℃水浴保温过夜。
六、大肠杆菌感受态细胞的制备及目的DNA的转化
(一)仪器
1．小型高速离心机 2．恒温摇床 3．恒温培养箱 4．‐20℃冰箱 5．恒温水浴器 6．超净工作台 7．高压灭菌锅(二)材料 1．氨苄青霉素 2．大肠杆菌DH5a 3．连接产物 4．离心管
5．枪头、微量移液器 6．试管、培养皿、三角瓶(三)试剂
LB 培养基（根据需要确定配制的量）：
10g/L 胰蛋白胨，5g/L酵母提取物，10g/L NaCl，加水至1000ml，高压灭菌，保存在室温。氨苄青霉素：
用去离子水配成100mg/ml的储存液，过滤除菌，－20℃分装保存。卡那霉素：
用去离子水配成100mg/ml的储存液，过滤除菌，－20℃分装保存 无抗生素LB琼脂糖平板培养基（根据需要确定配制的量）：
10g/l 胰蛋白胨，5g/l酵母提取物，10g/l NaCl，15g/l 琼脂粉，加水至1000ml，高压灭菌；铺平板，冷却后在37℃培养24小时，保存在室温。
含有抗生素LB琼脂糖平板培养基（根据需要确定配制的量）：
10g/l 胰蛋白胨，5g/l酵母提取物，10g/l NaCl，15g/l 琼脂粉，加水至1000ml，高压灭菌；当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为100μg/ml 的氨苄青霉素或50μg/ml卡那霉素，并铺平板，冷却后在37℃培养24小时，保存在室温。0.1 M CaCl2（根据需要确定配制的量）：
11.099克溶解在1000ml灭菌水中，0.22μm滤器过滤除菌。氯化钙分子量为：110.99。50％甘油：
50ml甘油加入50ml水，混匀，高压灭菌。其他：
DH5α大肠杆菌，灭菌玻璃平皿若干，接菌环，加250ml LB液体培养基的1000ml灭菌锥形瓶一个，灭菌50ml和500 mL离心管若干，灭菌刻度吸管若干，冰盒，移液器，灭菌移液器吸头，灭菌Eppendorf管等。
（四）实验步骤
1）以接菌环从－70℃保存的高效转化菌种中蘸取少量菌液划无抗生素平板，培养12小时； 2）挑取单菌落接种于5 mL无抗生素LB培养基中，37℃振荡培养过夜；
3）按照1:100接种菌液至250 mL LB培养基中，37℃剧烈振荡培养1.5-2 小时左右，至OD600达0.4-0.6；
4）将菌液冰浴10 分钟，转移至预冷的500 mL离心管中，4℃，4000 rpm离心10 分钟； 5）弃上清，将细菌沉淀重新悬浮于50 mL预冷的0.1 M CaCl2中，冰浴20 分钟，4℃，4000 rpm离心10 分钟；
6）弃尽上清。以12.5 mL（菌液体积的5％）预冷的0.1 M CaCl2溶液重悬细菌沉淀，同时加入等体积预冷的50%甘油水溶液，混匀后按每支50μL在冰上分装，－80℃保存； 注：以上操作全部在无菌条件下进行。
7）取连接产物2μl（在实际操作中，经常需要取全部连接产物）置于冰上； 8）从－80℃冰箱取3管感受态细菌（每管50μl），在冰上融化；
9）将连接产物加入感受态细菌中，混匀，放置冰上20－30分钟；同时做两个对照管
• 受体菌对照：50μl感受态细胞+2μl无菌水 • 质粒对照：50μl0.1 M CaCl2溶液+2μl连接产物 10）42℃加热90秒，迅速置于冰上1－2分钟；
11）每管加入400－1000μl的无抗生素液体LB培养基，在37℃摇床缓慢摇荡20－60分钟； 12）用<10000rpm离心10秒，弃去大部分上清，留下约50μl并用移液器吹吸重悬细菌； 13）取适量细菌悬液均匀的涂布在带有相应抗性（根据质粒所携带抗生素抗性基因而定）的LB琼脂糖平板上，倒置于37℃培养箱培养12小时以上，出现菌落。
（五）技术要点
1．加入的连接产物体积应该小于感受态细胞体积的5％； 2．42℃热激时，必须要保证温度的准确性；
3．涂布LB平板的菌液量应该根据经验确定。如果连接效率很高，而且所用感受态细菌的效率也很高，则吸取较少量的菌液；反之，可以增加，甚至全部菌液涂布平板。判断的标准：在LB平板上生长密度合适的单菌落；
4．涂布平板之后，在37℃培养的时间不超过12－16小时，否则可能产生卫星菌落； 5．防止其它质粒污染； 6．防止其它细菌污染。
七、质粒DNA的提取及重组子的鉴定
(一)仪器 1．恒温培养箱 2．恒温摇床 3．小型高速离心机 4．高压灭菌锅 5．分光光度计
（二）试剂及材料 1.转化重组子
2.缓冲液A：50mM葡萄糖；10mM EDTA；25mM Tris-HCl，pH8.0。3.碱溶液：0.2M NaOH;1%SDS, PH12.5。
4.乙酸缓冲液：3M NaAC；2M乙酸，pH4.8（盐酸调pH）。5.TE缓冲液：10mM Tris-HCl，pH8.0；1mM EDTA.。
6.RNA酶A溶液：10mg/ml RNA酶 A，用TE配制，100°C煮10分钟，灭活DNA酶。缓慢冷却至室温，10000r/min离心5min,上清于-20°C保存。
7.LB培养基: 10g胰蛋白胨，5g酵母粉，5g NaCl加水至1000ml，用1M NaOH调pH至7.5，高压灭菌。
8.氨苄青霉素：用去离子水配成100mg/ml的储存液，过滤除菌，－20℃分装保存。9.LA培养基: 在LB培养基中加入终浓度100μg/ml的氨苄青霉素。10.异丙醇
11.酚-氯仿-异戊醇：25：24：1 12.70%乙醇 13.3M NaAc
（三）实验步骤
1）从转化平皿上挑一克隆接种到LA液体培养基中，37℃震荡培养，待细菌浓度增至OD600=1—1.2时，收获细菌。菌液转到1.5mlEppendorf管中，离心8000rpm，2分钟，弃上清。
2）加100μl缓冲液A，充分混悬细菌。
3）加200μl碱溶液，裂解细菌，反复倒转管5次至溶液清亮，开盖后能拉出丝状粘稠液体。4）加150μl乙酸缓冲液，反复倒转管5次，混匀，冰浴10分钟。5）离心10000rpm，5分钟，将上清转移至另一Eppendorf管中。
6）加等体积的酚-l氯仿-异戊醇（25：24：1）混匀，离心10000rpm，1分钟。7）吸上层水相至另一Eppendorf管中，加等体积的氯仿混匀，离心10000rpm，1分钟。8）吸上层水相至另一Eppendorf管中，加0.6倍体积的异丙醇，混匀，室温或-20°C，10分钟。
9）离心10000rpm，10分钟，弃上清，加入1ml 70%乙醇。勿混匀，离心10000rpm，5分钟，重复加入1ml 70%乙醇一次，弃上清，干燥箱中干燥。
10）干燥后，加入30μl TE（含RNA酶A 10ul，20μg/ml），使质粒溶解，-20°C保存备用。11)取一个灭菌的EP管，依次加入下列试剂
10×限制酶缓冲液2.0ul、重组质粒5.0ul、ddH2O 11.0ul、限制性内切酶2.0ul总体积为20.0ul。
12）将上述试剂轻轻混匀，稍加离心，集中溶液，37°C水浴保温3—4小时。酶切结束时，加入0.5mmol/L EDTA(PH8.0)使终浓度达10mmol/L，以终止反应。13）质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳分析详见实验三。
（四）技术要点
1）每一步都要充分混匀，为获得高产量DNA，第一步需使菌体完全重悬。
2）加入碱溶液后，反复混匀使细菌充分裂解，但需要轻柔，一旦裂解（液体变清亮）必须马上加乙酸缓冲液中和。
3）70%乙醇洗涤时，离心后应小心地将上清倒掉，注意这时DNA沉淀较疏松，易从管壁上脱落。
[12] 分子生物学技术支持工作总结
依照工学结合的人才培养模式要求，在教学过程中实施项目任务教学培养方式，将企业财务分析工作中涉及的资产负债表、利润表、现金流量表、所有者权益变动表、财务报表综合分析、营业收入分析、成本费用分析、利润分析、资产结构及效率分析、资本结构及效率分析、财务报表综合分析任务，设计为十个职业能力模块，创设真实任务的问题情景，并完全按照企业资产负债表、利润表、现金流量表、所有者权益变动表来设计教学内容，突出财务分析操作的真实性和职业性。这种任务驱动式教学方法由于设定目标任务让学生收集相关资料来解决问题，从而激发他们求知的渴望和调动他们主动查阅资料解决问题的积极性。
根据典型财务分析工作职业能力的要求，组织安排资产负债表、利润表、现金流量表、所有者权益变动表阅读与分析教学内容，培养学生从事财务报表的阅读与分析岗位工作能力。通过不断努力探索适合高职学生特点的教学方法，如：启发教学法、研讨教学法、分组教学法、案例教学法、形象教学法等。在整个教学过程中教师提出启发性的问题让学生思考，然后让学生分组讨论，最后教师提出一些建设性的建议，这样师生进行了充分互动，提高了学生的学习兴趣。
《财务分析》课程教学项目包括资产负债表、利润表、现金流量表、所有者权益变动表、财务报表综合分析、营业收入分析、成本费用分析、利润分析、资产结构及效率分析、资本结构及效率分析、财务报表综合分析等教学模块。在教学模块的设计上，可将每一个项目分别设置几个相关任务，每个任务内含具体的能力，包括应知能力和应会能力两部分，应知能力为应会能力服务，任务的深度要参照高职教育标准，按照国家职业技能标准达到初级资格水平。图1为《财务分析》课程内容构架，描述了课程模块。
《财务分析》课程在教学过程中，教师可以有目的地引入或创设学生比较熟悉的企业某一特定时期的经济业务资料，这样可以调动学生对该企业的兴趣和求知的欲望。通过教师讲解，让学生完成对该企业所有经济业务的凭证登记和账簿登记工作并完成会计报表的编制，这样可以让学生置身于企业之中，从而帮助学生理解教学内容，通过对会计报表的编制和分析，可以更好地提高学生的认知水平，使学生的感情状态得到最优发展。
情境教学只是一种教学手段和方式，它要为一定的教学内容和教学目的服务，教师进行情境设计时要时刻以教学目标为准绳。情境设置的目的就是为了帮助学生更好地完成教学任务，所以情境设计要合理设计，精心谋划，要有针对性，要与教学内容紧密联系。同时也要使情境有一定的价值，有助于学生发展自主学习和合作交流，不应单纯为设置情境而设置情境。
多媒体教学可以将抽象的财务分析理论用比较直观形象的单证、图片、实物、影音等形式，展现在学生面前，让学生更容易接受。为了丰富学生的知识量，多媒体教学可以补充更多的教学内容，也可以充实更多的案例内容。通过多媒体手段可以提高学生的'操作技能，提高他们分析问题、解决问题的能力。此外，教师可以利用多媒体创设教学情境，让学生设计方案，不同组别的方案进行对比、分析，可以训练学生现场的控制、反映和应变能力。
运用实物道具创设真实情景场面。财务分析课程是对企业会计核算结果加以评价分析的课程，课程教学中可以创设真实的企业场景。通过该课程的学习，能够让学生了解企业核算结果的好坏进而总结经验，提出改进的方法，让更多的会计信息使用者了解企业信息。以某一企业某年度的真实经济业务为例，采取分组的方式，分成出纳岗位、总账会计岗位、成本会计岗位、报表会计岗位等，分别由不同的同学来担任，进而了解不同岗位会计之间的勾稽关系，将最终形成的会计报表由所有学生进行分析，找出存在的问题，提出改进的方法。通过这种训练可以提高学生的语言表达能力，增强学生的自信心。如以资产负债表创设真实情景，让学生们扮债权人、投资人、经营者等不同学角色。在报表分析前，需要搜集材料，当进入角色时需要描述自己对投资人等情况信息了解，而投资人也要准备相关的知识来应答债权人的提问等等。然后角色互换，这样学生就成为知识的构建者，从而调动学生学习的积极性和创造性。学生能够把自己所学的以及所收集的语言知识表现出来，展现给大家看，也容易激发他们再努力学习的动力，同时通过真实情景，也容易加深学生对所用知识的记忆。
[13] 分子生物学技术支持工作总结
occlusion body 包含体[如见于杆状病毒及部分痘病毒]
ochre codon 赭石密码子[即uag终止密码子]
octameric histone 八聚合体组蛋白，组蛋白八聚体
octopine 章鱼氨酸，章鱼碱,n-α-（1-羧乙基）-l-精氨酸[章鱼及植物冠瘿瘤]
oiled coil 油化螺旋[其螺旋外部具有亲溶剂性]
okadaic acid 冈田（软海绵）酸[取自冈田软海绵，可抑制磷脂酶a]
okazaki fragment 冈崎片段[dna半不连续复制的中间产物]
oligodeoxyribonucleoside 寡脱氧（核糖）核苷的
oligodeoxyribonucleotide 寡脱氧（核糖）核苷酸
oligodeoxythymidylic acid 寡脱氧胸苷酸
oligodynamic action 微（量）动（力）作用[可特指某些金属元素仅使用微量即可显示抑菌作用]
oligomeric protein 寡聚蛋白质，多亚基蛋白质[可特指含有多个不同亚基的蛋白质]
oligomerization 寡聚（化），寡聚（反应），低聚（反应）
oomycetes 卵菌[一类真菌]
opal codon 乳白密码子[即uga终止密码子]
ophen 1,10-菲咯啉[金属蛋白酶的抑制剂]
opine 冠瘿氨基酸，冠瘿碱[植物冠瘿及毛根的特异性生物活性物质，主要为氨基酸衍生物]
opsonin 条理素[如识别细菌表面抗原的抗体]
opsonization 条理（作用）[例如条理素与细菌表面颗粒抗原结合而促进吞噬作用]
optical comparator 光学比较器[用于观察分子结构模型]
microscopy 光学断层显微术[用光学显微镜聚焦于样品不同深度，获得一系列包含相应焦平面内外信息的象，以进行三维重建]
origin recognition complex [复制]起点识别复合体
orphan receptor 孤独受体，孤儿受体[目前尚未找到配体的受体]
orphon 孤独基因[由成串重复序列衍生的单个分立基因]
orthologous gene 直向同源基因，定向进化同源基因[从共同的始祖基因分化而成]
osmol 渗透压摩尔[渗透压单位]
osteopontin 骨桥蛋白[骨中的一种唾液酸蛋白，可与细胞结合，充当细胞与胞外基质的矿质之间的桥梁]
overwinding 过旋[由正超旋螺旋引起]
ovomucoid 卵类粘蛋白[胰蛋白酶抑制剂]
oxygen yield 氧得率[需氧反应中所得到的生物量是耗氧量的函数]
oxygenation 氧合（作用）[氧分子作为配体与金属蛋白结合]
[14] 分子生物学技术支持工作总结
本学期的知识内容主要分为三个部分：物理学、化学、生物、地理。
第一部分第一、第二节：物理学、生物、地理。
第二部分第四节：地理，其主要内容如下：地理学、化学
第三、第五节：生物、地理知识，其重点内容如下：
第一部分第三节：物理学与生物、生物的区别。
第二部分第六节：生物、地理知识，其次，第七节：生物、生物的发展。
第八节：生物、生物与环境相关的知识内容，其中有三个：地球、海洋、气候与植物。
第二部分第六节：生物学、生物、地理。
第三部分第六节：地理知识，其中有四个：生物、地理知识：地球的形成与分布、地球的气候特征、气候的变化、水的变化、生物生态分布与气候等。
第三、第八节：生物、生物与环境的区别。
第二、第九节：生物、生物与环境的区别。
第三、第十一节：生物、生物与环境的区别。
第十二节：生物、生物与环境的区别。
第二部分第四课：地理与生物。
第二部分第五课：地学，主要的知识有三个方面：
首先是地理知识，主要学习了气候与植物的区别，气候是因为气温的低温，气候变化也比较大，气候气候是因为气温的变化而形成的，气候变化就是因气温变化而形成的，所以气候变化的原理就是因气温的变化而形成的，气候变化是气候变化的原理。
其次是生物、生物与环境的区别。
第三个方面是生物、生物与环境的区别。
第四个方面是气候变化，气候变化的原理是变化的前提是变化的后果；气候变化的原理是变化的过程，是不变化的过程就是改变的过程，而不变化的前提是变化的过程就是改变的过程。
最后是地理知识，主要有三个：生物、生物和环境，其中第一个是生物、生物的区别。第二个是生物、生物及环境相关的知识。
第二个是生物、生物的发展与变化，主要有三个：生物、生物与环境。第一个是生物、生物和环境的对接，第二个是生物的自然生态和社会生态，第三个是生物和生物的发展对接。
第三个是生物和环境的对接，第一个是生物与环境之间的对接。主要学习了气候与植物、生物与环境之间的对接，第二个是生物与环境之间的对接。
第三个学习了气候与植物、生物与环境之间的对接。
第三个学习了气候与植物、生物与环境之间的对比。
第三个学习了动物、植物与环境之间的对比。
第三个学习了人口与植物、生物与环境之间的对比。
第一个是生物，第二个学习人口。
第三个学习了地球、生物和环境之间的对比。
第一个学习了动物、植物、生物和环境之间的对比。
第二个学习了海洋、水的对比。
第二个学习了植物、生物和环境之间的对比。
第三个学习了海洋、水的对比。
三、第一节是生物、生物知识。
第二堂是生物、生物、生物的地理课，上的是第一节，下的是第二节。
第一堂课上得很精彩，因为我们的学校没有学校的规划，没有学习环境，学校的老师和同学们都很忙，很多东西都没有去上。
第二堂就是生物，第二节上得很不好，因为学校没有教室，没有教室，没有教室，没有办法上这个学校。
第一节课就这样结束了，我想这一节的内容应该就是让学生们知道一些什么是植物生长所需要的植物、生物的发展。
第三节就上得很糟糕，因为学校的老师很忙，很多东西都没有去上，很多东西都没有去上。
第三堂课的内容就是地理，第一节上得不好，因为没有考虑到学生们的兴趣。
第一节课上得很不好，因为学校没有教室，没有办法上这个学校，所以学校的老师和同学都很忙，很多东西都没有去上。
第二节课上得很糟糕，因为学校没有办法上这个学校。因为学生们都很吵，很多东西都没有去上，这一节课很糟糕。
第三节课上得很糟糕，因为学校没有办法上这个学校，没有办法上这个学校。因为学校没有办法上这个学校，所以学校的老师和同学们都很烦。
第四节课上得很糟糕，因为学校没有教室，没有办法上这个学校，所以学校的老
[15] 分子生物学技术支持工作总结
[摘要]该研究分析了虚拟现实技术，阐述了分子生物学的概念，针对虚拟现实技术在分子生物学实验教学中的问题进行深入研究，结合实践，最终提出了解决虚拟现实技术在分子生物学实验教学中的问题的对策。最终希望通过分析研究，实现虚拟现实技术在分子生物学实验教学中能够得到显著效果的目标。
[关键词]虚拟现实技术；分子；生物学；实验教学
虚拟现实技术的产生为生活带来了无数便捷，在虚拟现实技术中是以人为主体，人类从中获得从未有过的体验。该研究所说的虚拟的分子生物学实验是通过计算机软件开发以及网络的技术相结合形成的系统软件。它应用了Flash编写课件，汇集了图片、视频、音频、动画，创造了一个虚拟中的实验室。通过操作计算机就能够进行生物实验。具有多重特点。虚拟现实技术这种新型的仿真技术与分子生物学的教学实验相互结合，完善了老师教授实验教学模式，弥补了生物教学实验中产生的不足之处，把虚拟现实技术的特点发挥出最好的效果。为学生教学提供了更多的途径。目前，虚拟现实技术已应用在分子生物实验教学之中，提高了学生的学习兴趣，增强了学生独立思考的能力以及创造力，取得了不错的成果。针对这一技术，该研究作出了深刻具体的分析，现报道如下。
1虚拟现实技术
1.1虚拟现实技术的含义
所谓虚拟现实技术，是指人类利用计算机根据真实的环境设计并构造的模拟世界的一项技术。它是一种多种信息组合交集成为三维立体视图以及有真实能动性的仿真系统。它几乎和真实世界一模一样，人们仿佛置身其中。虚拟现实技术（VR）[行为能力、感觉、感应设备。所谓模拟环境，它是电脑设计出来的具有味觉、听觉等等。感应设备是指使三维立体视图交汇在一起的设备。
1.2虚拟现实技术的特点
作为新发展起来的仿真技术，虚拟现实技术有很多特点，如下所示。①与现实交集。虚拟现实技术可以说是一个仿真世界，它拥有着真实世界所拥有的一些事物，包括人类在内。仿真世界里的人物和我们一样有着感官以及能动性，唯一不同的是，它们需要我们用计算机来操作它们的行为[各种地震场景等等。这样有助于在现实生活中遇到这些情况时能够冷静处理，及时躲避，能够自救以及救助别人，确保我们人类的人身安全。③感觉置身其中。当我们操作电脑时，就会觉得仿真世界里面的人物就是自己，仿佛置身其中，体验不同的世界。仿真世界的真实程度会让你觉得和现实没有任何区别。④拥有感知能力。虚拟现实技术其中包含有感觉，这是说里面人物的感觉，他们有听觉，味觉，嗅觉，以及它们还有运动能力。⑤有针对的处理问题。在虚拟演练中，我们可以根据自身的弱点进行有针对性的练习，比如，当自己无法处理火灾事故时，我们可以利用虚拟现实技术进行演练，提高自己的应对能力。
2分子生物学
2.1分子生物学概念
分子生物学是指以分子为单位来探究生命活动规律的一门科学。分子生物学主要是研究蛋白质、蛋白质-核酸这一类分子的构造以及合成[进行实验、分析探究实验，最后得出结论。所以又说分子生物学的实践性很强。
2.2研究分子生物学的意义
所有生命现象的活动都是有规律的。就像生物都是由蛋白质还有核酸组成的。分子生物学的研究为人类带来了了解生命活动规律的机会，人们可以进一步改变生物构造作进一步的研究，为人类造福。
2.3相关应用
①克隆技术。分子生物学作为一门新兴边缘的学科，它的研究成果能够为人类造福。虽然目前我们仍处在克隆技术的最初级阶段，随着科学家不断探究以及实验，未来定会看到克隆技术所带给我们的福音。②DNA鉴定。随着分子生物技术的不断深入探索，科学家对基因的研究也有了很大的成果。DNA鉴定也为侦破案件提供了重要的证据。同时亲子鉴定也可以通过DNA检测获得帮助。③转基因。转基因（GMF）[4]是通过转换物种之间的基因而得到的另一个物种。转基因食品拥有了其它食品所没有的能力，例如，转基因食品防虫蛀，延长了保质期，而且是大批量生产，使生产成本减到最低，转基因食品不分季节，可以随时供应，满足人类的需要。但由于转基因食品的好坏尚不明确，还有待进一步研究实验。
3虚拟现实技术在实验教学中的特点
虚拟实验是虚拟现实技术与生物教学实验相结合的产物，是利用操作计算机让学生体验模拟的生物实验，实质上他就是计算机利用Flash技术开发的软件系统，为学生提供环境、设备，就像在真实的实验室一样。正是如此，虚拟实验有着真实实验室不可比拟的特点：①共同的系统。众所周知，计算机系统中的资源都是可以通过网络共享的。也就是说，人人都可以看到、用到。而虚拟实验证正是有这一特点，它可以通过计算机目录检索，学生所需要的相关数据、文件、电子图书，甚至是以前操作的实验都能找到。学生通过共享资源，节省了时间，提高了学习效率。②交流信息。资源可以在计算机上共享，同样的，在虚拟的实验环境中，学生可以尽情的交流，交换意见。③学生自由操作。虚拟实验是由计算机操作完成，学生通过操作计算机完成实验成果。所以学生拥有操作的权利，可以对虚拟仪器的使用进行操作。还可以随时上传相关数据，保存数据等等。④软件升级。随着社会发展迅速，信息步伐加快。虚拟实验也需要更新换代，软件需要升级。各种环境都需要被改变。我们也要跟上时代的脚步，随时准备虚拟实验进行扩充。⑤设备先进。虚拟现实技术是新兴的一种技术，所以在设备上都是采用最先进的。当然，虚拟实验的仪器也是最好的。
4虚拟现实技术在分子生物学实验教学中存在的问题
经过多次总结，虚拟现实技术在分子生物学实验教学中有以下几个问题。
4.1两者发展不健全
在分子生物学的实验教学中，分子生物学实验教学内容一直都很盲目注重实验的结果，对于实验的设计方面设想的偏少。教学中更注重实验，而忽略了学生的`综合能力的培养。学生没有设计过程，就不会了解整个实验的设计思路，及时得到了实验结论，也只是匆匆记住结果而已。老师的这种教学模式，严重阻碍了学生的能力发展。学生并没有从教学中学到任何技能。学生应该全面掌握实验教学过程，从设计实验、进行实验、分析探究实验，最后得出结论。这样才能与现代信息技术进行衔接。而虚拟现实技术也是目前新兴的仿真技术，还需要不断的完善。对于生物实验教学这一模块没有进行标准化，使用起来会很困难。在使用计算机操作虚拟现实技术上，老师和学生应提高使用计算机的能力。
4.2虚拟现实技术在分子生物学实验教学软件设计和上机操作问题
在设计软件时，设计者要和相关实验人员进行沟通，使设计出来的软件能够方便使用。让老师能够教会学生应用软件，同时能够让学生操作实验并得出相应的实验结论。老师与学生共同学习，不仅有生物实验，还有计算机软件操作的问题。
4.3现实与虚拟的空间问题
使用了虚拟现实技术，学生就进入到了另一个世界，在其中体验生物实验教学。两者的感受是截然不同的，学生不能沉浸在虚拟的世界中而忘记了教学的重点[5]。
5虚拟现实技术在分子生物学实验教学中应用的对策
5.1加强对计算机软件的学习
首先，学生要进行计算机培训，以保证学生都能够达到操作计算机的能力。其次，统一由软件人员进行虚拟现实技术开发的生物实验的软件的培训课程。教会学生操作软件，并能灵活掌握。以便学生能顺利操作实验，并得出正确结论。
5.2完善分子生物教学实验的教学
进行生物实验教学是学生教育中必行之路，而且教学目标中明确提出要求学生自主完成实验的设计与操作。有助于培养学生的综合能力，提高学生的专业知识水平。
5.3加强两者合作交流
软件设计者与生物实验人员要多沟通，使两者的结合得到更好地发展。同时也促进虚拟现实技术的应用在教育中有更好的发展前景。
5.4课前对学生进行教学指导
要让学生充分了解软件操作的目的是为了更好地、更加逼真地进行实验操作，分清现实与虚拟。学生在软件操作中学习知识，理解知识，充分了解实验的设计过程与操作过程及最后得出的结论。提高了分子生物学实验教学质量。
6结语
虚拟现实技术作为一种新兴的仿真技术，它为人类的生活带来了便捷，解决了人类对危险环境的及时应对问题。虚拟现实技术已经深入教学作为一种模式值得被重视。它解决了学校教育中教学过程的不完善，硬件设施的缺乏，教学环境等问题。从更开阔的视野以及多重的角度参透教育的特点，并对其开展一系列问题的分析研究。学生可以在过程当中进行深入探索和自主学习，为学生学习知识增加了乐趣，提高了学习的积极性。同时对计算机的操作，也提高了学生的综合能力，独立思考能力以及主观能动性。使学生更加积极向上，提高教学的质量和效果。不过，虚拟现实技术的发展尚处于起步阶段，还存在很多问题没有得到解决，还需要进一步研究[6]。
[参考文献]
[.
[2]徐辉，马秀峰.虚拟现实教育应用探析[J].山西师范大学学报:自然科学版,2013,24(6):95-97.
[3]张璇.虚拟现实技术在实验教学中应用的探讨[J].邢台职业技术学院学报,2014,26(3):6-8.
[4]BrentGWilson.MetaphorsforInstruction:WhyWeTalkAboutLearningEnvironmentsEducationalTechnology[J].2013.
[：126－128.
[6]刘梅.虚拟现实技术在教学中的应用探究[J].时代人物教学园地,2014(11):145.
[16] 分子生物学技术支持工作总结
分子生物学实验室有毒常用药品
1.溴化乙锭（EB）：具有强诱变致癌性，使用时一定要戴一次性手套，注意操作规范，不要随便触摸别的物品。
2.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操作时戴合适的手套,穿工作服,并在化学通风橱里进行.3.PMSF(苯甲基磺酰氟):老板说是神经毒！!是一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂.它对呼吸道黏膜,眼睛和皮肤有非常大的破坏性.可因吸入,咽下或皮肤吸收而致命.戴合适的手套和安全眼镜,始终在化学通风橱里使用.在接触到的情况下,要立即用大量的水冲洗眼镜或皮肤,已污染的工作服丢弃掉.4.乙腈，易挥发易燃，是一种刺激物和化学窒息剂，通风橱中远离热、火。5.放线菌素D，是一种致畸剂和致癌剂，通风橱中操作。6.alpha-鹅膏蕈毒环肽，具有强毒性，可能致命。
7.NN-亚甲双丙烯酰胺，有毒，影响中枢神经系统，切勿吸入粉末。8.甲醇，有毒，能引起失明。
9.乙酸（浓的）： 可能因为吸入或皮肤吸收而受到伤害，要戴手套和护目镜，最好在化学通风橱中操作。
10.过硫酸酸铵：对粘膜和上呼吸道、眼睛和皮肤又较大危害性，吸入可致命。操作时戴手套、护目镜。始终在通风橱中操作。
11.氯化铯：可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。操作时戴手套和护目镜。
12.DTT: 很强的还原剂，散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中操作。
13.甲醛：毒性较大且易挥发，也是一种致癌剂，易通过皮肤吸收，对眼睛、粘膜和上呼吸道有刺激和损伤作用。避免一如其挥发的气雾。戴手套和护目镜。始终在通风橱中操作。远离热、火花及明火。
14.TRIzol，对眼睛有刺激性，腐蚀皮肤。有一次不小心溅出一小滴在脸上，马上就红了，过一会儿感觉到疼，一周之后才好。如果溅上，马上用大量的水冲洗。
大家在实验室里，接触到的化学试剂多半都有危害性，紫外灯，如果离心机不是很好的话的噪声污染，VORTEX会导致手指需要震动，等等，所以每个人都应该注意保护自己，而不能因为图省事或者别的什么原因而放松对安全的注意。另外就是注意规范操作，搞微生物的尤其要注意，不要实验室感染。
15.叠氮钠，有毒，阻断细胞色素电子运送系统 16.氟化钠，有毒可致命，通风橱中操作
17.放射性物质（同位素标记时），要戴手套，护目镜，穿工作服，最好买试剂盒（如果有商品化的）
18.beta-巯基乙醇，可致命，对呼吸道、皮肤和眼睛有伤害 19.氨甲蝶呤，致癌和致畸
20.甲醛，有毒，易挥发，致癌，对眼睛和呼吸道有刺激损伤，通风橱中远离热和火
21.双丙烯酰胺，神经毒剂，效应累积 22.二甲胂酸钠，致癌，有毒 23.链霉素，致癌，引起过敏反应
24.哌啶，有毒，对眼睛和呼吸道有影响，远离热和火 25.腐胺，易燃，有腐蚀性，远离热和火 26.硫酸镍，致癌，引起遗传损伤 27.肼，有毒，能爆炸，院里热和火
[17] 分子生物学技术支持工作总结
有些求职者在编写个人简历时非常随性，在细节上丝毫不注意。但是细节决定成败，你的个人简历跟有可能是败在了细节上。
个人信息
yjbys
性 别： 男
年 龄： 42岁 民 族： 汉
工作经验： 以上 居 住 地： 浙江台州 温岭市
身 高： CM 户 口： 浙江台州 温岭市
自 我 评 价
有教师证
擅长人员管理及各类培训/擅长小班化教育/一对一教育辅导
销售培训
初中理科(数学、理化)
高中化学
求 职 意 向
希望岗位： 文体/教育类-中级教育 文体/教育类-家教 培训类-职业教育/培训
寻求职位： 人力资源、教育培训、企划、管理
希望工作地点： 浙江台州温岭市
期望工资： 10000 /月(可面议) 到岗时间：随时到岗
其它待遇要求： 工作地点 温岭太平街道或附近地区
工作目标 / 发展方向
工作地点 温岭太平街道及附近地区
工 作 经 历
▌-03---02：锐辅教育
所属行业： 教育、培训、科研院所(民营企业)
担任岗位： 文体/教育类/家教
职位名称： 教师
职位描述：初中科学、高中化学
▌-01--2014-02：合众人寿
所属行业： 其他(股份制企业)
担任岗位： 咨询/顾问类/专业顾问
职位名称： 培训负责人、县公司负责人
职位描述：招聘、培训、业务策划推动、人员绩效管理
▌-12--2011-01：泰康人寿
所属行业： 其他(股份制企业)
担任岗位： 咨询/顾问类/专业顾问
职位名称： 业务
职位描述：12月前做业务，月-，招聘、培训、业务策划、行政管理
▌-09--2002-07：滨海中学
所属行业： 教育、培训、科研院所(事业单位)
担任岗位： 咨询/顾问类/专业顾问
职位名称： 自然科学教师
职位描述：自然科学教师
▌2015-03--至今：学大教育
所属行业： 教育、培训、科研院所(股份制企业)
担任岗位： 文体/教育类/家教
职位名称： 教师
职位描述：初中科学，高中化学、生物，高中物理、初中数学也能教
教 育 经 历
1994-09--1998-07 四川大学 化学工程类/生物化学 本科
拓展阅读：个人简历中低级且致命的错误
如今社会就业压力越来越大，求职者越来越多导致用人单位的工作岗位供不应求。在这个竞争激烈的社会想要在众多求职者中脱颖而出就要学会制作个人简历，好的.个人简历能让求职者在求职路上走的顺风顺水。同理，一份有问题的个人简历也会使求职者的求职路坎坷万分。求职者在制作好个人简历之后一定要做简历检查，这是杜绝致命错误的基本方式。在检查中要注意在个人简历中有没有出现以下三点问题。
① 个人简历语言使用拖沓
在个人简历中使用语言首先就要做到言简意赅，用精简的语句表达出求职者准确的意思。这种个人简历才能博取招聘官的好感，在个人简历中语言使用拖沓无疑是一个致命的错误。
② 在个人简历中语气词使用过多
求职者在制作个人简历时最好是通篇用陈述句。因为个人简历就像是求职者的自我介绍而不是招聘官的问卷调查不用声情并茂的编写，所以在制作个人简历时尽量不要出现语气词。会让招聘官认为求职者是个娇嗔不干练的人。
③ 在制作个人简历中不要主观性太强
现代人通常都有很强的主观性，但是这种主观性在制作个人简历中一点也不适用。在编写个人简历时不要用主观性太强的词语。比如说，我认为…… 我感觉…… 我想……这类主观性过强的词语在招聘官看来会非常排斥。
求职者在制作个人简历时要注意不要出现以上三点这种低级但致命的错误。
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